黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞E-cadherin、Snail1表达的影响

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:songsiliang
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目的:研究黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及其相关因子E-cadherin和Snail表达的影响。材料与方法:黄芪建中汤含药血清联合不同浓度顺铂(0、2、4、8、16、32、64ug/ml)培养人肺腺癌A549细胞株48h,采用四唑盐比色法(MTT)检测细胞株的抑制率,确定联合顺铂的最佳用药浓度;将人肺腺癌A549细胞株分为4组,即空白组、中药组、顺铂组、联合组,依次用完全培养基、黄芪建中汤含药血清、顺铂、黄芪建中汤含药血清联合顺铂干预,各组细胞株培养48h后,采用MTT法检测各组细胞株的抑制率。免疫细胞化学法(IHC)、免疫蛋白印迹法(WB)检测各组细胞株E-cadherin、Snail1蛋白的表达。实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测各组细胞株E-cadherin、Snail1基因的表达。结果:1.联合用药时顺铂的最佳浓度为8ug/ml;联合组人肺腺癌A549细胞株抑制率高于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.各组人肺腺癌A549细胞中,E-cadherin阳性表达多在细胞膜,Snail阳性表达多在细胞质,呈棕黄色颗粒着色。与空白组相比,中药组、顺铂组和联合组中E-cadherin蛋白表达棕黄色颗粒较多,联合组中E-cadherin蛋白表达棕黄色颗粒最多;与空白组相比,中药组、顺铂组和联合组中Snail1蛋白表达棕黄色颗粒较少,联合组中Snail1蛋白表达棕黄色颗粒最少。3.联合组人肺腺癌A549细胞株中的E-cadherin基因、蛋白表达水平高于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05);联合组人肺腺癌A549细胞株中的Snail1基因、蛋白表达水平低于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺腺癌A549细胞株有抑制作用,其机制可通过增强人肺腺癌A549细胞株中E-cadherin基因、蛋白的表达,降低人肺腺癌A549细胞株中Snail1基因、蛋白的表达实现。
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