【摘 要】
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剑麻是世界最重要的麻类经济作物,其应用广泛,综合价值高,前景广阔,但是其受到斑马纹病的危害。剑麻斑马纹病是影响剑麻生产种植的最严重的病害之一,该病致病菌为烟草疫霉菌,
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剑麻是世界最重要的麻类经济作物,其应用广泛,综合价值高,前景广阔,但是其受到斑马纹病的危害。剑麻斑马纹病是影响剑麻生产种植的最严重的病害之一,该病致病菌为烟草疫霉菌,是一种传染性病害,会导致剑麻麻区植株染病,最终导致剑麻产量大量降低,严重地制约剑麻产业的可持续发展,造成巨大的经济损失。本研究以提高剑麻品种H.11648抗病性为目的,开展以下研究:1.以pCAMBIA1300为基础载体,构建了病原菌诱导型启动子Hrs203J启动APX 基因和 hevein-like 的双价表达载体:pCAMBIA1300-Hr203J-Hevein-NOS-Hr203J-APX-NOS,用冻融法将载体导入根癌农杆菌EHA105中。2.将从广东广西采集的14株剑麻斑马纹病病原菌进行rDNA-ITS序列分析,结果证明它们都是烟草疫霉菌,并且发现其基因类群与区域有一定联系,通过14株病菌致病力的分析,发现其致病力与菌株所在区域没有直接联系,筛选出致病力较强的2株烟草疫霉菌菌株。3.将植物表达载体 pCAMBIA1300-Hr203J-Hevein-NOS-Hr203J-APX-NOS通过农杆菌介导法对122个剑麻愈伤组织进行遗传转化,获得9株剑麻抗性植株,转化率约为7.4%。对获得的抗性剑麻幼苗进行PCR、RT-PCR检测,证明4株剑麻苗呈阳性,表明APX基因和hevein-like成功导入到剑麻基因组中,阳性转化率为44.4%。并将2株较强的菌株分别接种到4株阳性转基因苗叶片上,其结果为2号转基因剑麻苗株的抗病为2级高抗病,编号1、3、4剑麻苗抗病性呈中抗为3级抗病性。
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