【摘 要】
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目的:研究傣药箭根薯乙醇提取物对硫酸葡聚糖钠盐（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）小鼠的缓解作用,并以脂多糖（LPS）诱导小鼠RAW264.7细胞炎症模型探讨其抗炎作用及机制,为箭根薯的临床应用提供科学依据。方法:1、本实验采用3.5%DSS水溶液诱导建立UC小鼠模型,观察箭根薯醇提物低（200 mg/kg）、高剂量（600 mg/kg）给药后对UC小鼠的缓解作用,以小鼠体重、饮食量、疾病活动指数
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目的:研究傣药箭根薯乙醇提取物对硫酸葡聚糖钠盐（DSS）诱导的溃疡性结肠炎（UC）小鼠的缓解作用,并以脂多糖（LPS）诱导小鼠RAW264.7细胞炎症模型探讨其抗炎作用及机制,为箭根薯的临床应用提供科学依据。方法:1、本实验采用3.5%DSS水溶液诱导建立UC小鼠模型,观察箭根薯醇提物低（200 mg/kg）、高剂量（600 mg/kg）给药后对UC小鼠的缓解作用,以小鼠体重、饮食量、疾病活动指数（DAI）和结肠组织病理学评分等评价其药效;采用ELISA和RT-q PCR法检测结肠组织中相关炎性因子水平,WB技术检测结肠组织中相关蛋白表达水平,探讨其作用机制。2、MTT法检测箭根薯醇提物对RAW264.7细胞的存活率并确定给药剂量;采用IL-6、IL-1β及TNF-α的表达水平筛选并确定LPS刺激RAW264.7细胞炎症模型的最佳浓度和时间;应用ELISA和RT-q PCR法检测细胞上清液和细胞中相关炎性因子表达水平,WB技术检测细胞中相关蛋白表达,分析箭根薯醇提物的抗炎作用及其机制。结果:1、箭根薯醇提物对DSS诱导UC小鼠的缓解作用研究:与模型组相比,箭根薯醇提物给药后小鼠体重增加,DAI评分降低,HE结果显示小鼠结肠炎症状减轻,差异具有统计学意义（P<0.05）;ELISA结果显示箭根薯醇提物可极显著降低结肠组织中NO、i NOS、MPO的表达（P<0.01）减少炎症细胞浸润,极显著降低促炎因子IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α的表达（P<0.01）,显著升高抗炎因子IL-10的表达（P<0.05）;RT-q PCR结果中箭根薯醇提物可显著抑制结肠组织中IL-6和IL-1β的m RNA表达（P<0.05）;WB结果显示箭根薯醇提物对结肠组织中NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白表达呈下调趋势（P<0.05）。2、箭根薯醇提物对LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型的作用及其机制研究:MTT结果显示箭根薯醇提物对细胞存活率从40μg/m L开始对细胞的生长无明显抑制,所以药物剂量确定为40,20,10μg/m L进行实验;在1000,500,100 ng/m L LPS刺激细胞4、8、16、24 h后,分别检测IL-6、IL-1β及TNF-α的含量,综合结果最后取1000 ng/m L LPS刺激细胞24 h建立炎症模型;ELISA结果显示,LPS（1μg/m L）刺激RAW264.7细胞后,箭根薯醇提物可极显著降低炎性因子NO、i NOS、IL-6、IL-1β和MCP-1的含量（P<0.01）;由RT-q PCR结果可知经箭根薯醇提物治疗后i NOS、COX-2、IL-6、IL-1β和MCP-1的m RNA表达量较模型组显著降低（P<0.05）;在WB结果中经箭根薯醇提物治疗后NF-κB及MAPK信号通路相关蛋白均呈显著下调趋势（P<0.05）。结论:傣药箭根薯醇提物对DSS诱导的UC小鼠有明显的缓解作用,其作用机制可能与NF-κB和MAPK通路的调控相关。
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