胚胎干细胞（ES 细胞）具有发育的全能性。Oct4 与 Nanog 都是在ES 细胞中特异性表达的转录因子,对 ES 细胞多能性的维持起关键作用。Oct4 的功能主要是阻止 ES 细胞向滋养层细胞方向发生分化并维持 ES 细胞的自我复制能力。Nanog 能够使 ES 细胞在培养过程中不依赖于 LIF 而维持其多能性。1,本研究中我们利用生物学软件分析了 Oct4 的蛋白序列,发现在其 POUdomain 中有一段保守的核定位序列（RKRKR）可能参与其在细胞内的运输及调节机制。我们进一步的研究发现,该序列突变后不仅影响 Oct4 在细胞内的运输,还直接破坏了 Oct4 行使其转录激活调控基因的功能。更有趣的是,该突变体还能与野生型 Oct4 形成二聚体并进一步抑制其正常功能,也就是形成一种具有抑制性功能的突变体（dominant negative mutant）。将该突变体导入 P19 多能细胞后能进一步通过抑制内源性 Oct4 的功能导致其分化。2,我们研究和探讨了 Nanog 本身各个结构域的功能。利用 Gal4 及其报告基因系统及通过构建 Nanog 本身的报告基因。我们发现,Nanog 是一个拥有多功能结构域的具有基因激活功能的转录因子。在其 C domain 中存在两个结构独特,功能强大的转录激活区 WR 和 CD2。这两个转录激活区具有独特的结构特点及很强的保守性,迄今尚未在其它的转录因子的激活区中发现。这两个激活子 WR 和 CD2 分别在 Nanog 发挥功能时起着不同的作用。这些发现为进一步阐释拥有多功能结构域的转录因子——Nanog 维持 ES 细胞多能性的机制打下了基础。3,为揭示 Nanog 在 ES 多能性细胞中的表达调控机制,我们克隆并研究了Nanog 基因上游 promoter 的功能。我们克隆了 Nanog 基因上游 1.0k 左右的promoter 区,通过报告基因技术我们发现该 promoter 能够很好反映内源性 Nanog的表达模式。进一步通过构建不同长度的 Nanog promoter 的缺失体,我们发现位于 Nanog promoter 上游-676-733 的一段序列介导了 Nanog 的细胞特异性表达。这段序列中,含有一段潜在的 homeobox protein 的结合位点,提示在多能细胞中可能存在一种特异性的 homeobox protein 调控 Nanog 的表达。另外,我们通过凝胶阻滞实验证明在高表达 Nanog 的多能细胞中确实村一种特异性的蛋白能够结合该位点。该发现有助于进一步鉴定和识别结合 Nanog promoter 的Homeobox 转录因子,以利于发现新的调控 ES 细胞多能性的转录因子并阐明 ES细胞多能性的分子机制。