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[目的]:探讨神经干细胞(NSC)脊髓内移植对脊髓全横断(SCT)损伤大鼠运动功能恢复的影响,并研究其与神经再生,神经营养因子(NTF)表达的关系,为应用NSC移植治疗SCI提供理论依据。[方法]:正常成年SD雌性大鼠85只,分为两批;第一批15只动物用于BDA条件实验,分为双侧大脑皮质注射10% BDA 0.5μL/位点,存活2w组;单侧大脑皮质注射10%BDA 1 p L/位点,存活3w组;双侧大脑皮质注射10%BDA 0.5μL/位点,存活3w组。每组各5只动物。第二批SD大鼠共70只,分为3组:①假手术组,②单纯全横断组;③神经干细胞移植组;分别对每组每只动物进行BBB评分、诱发电位CSEP和MEP、电针刺激大脑皮质运动区的测定,观察行为学,神经电生理学变化;对各组动物分别进行BDA追踪,免疫组化染色,RT-PCR检测,观察NSC移植效果,植入细胞存活,分化,宿主神经再生,神经营养因子表达,信号分子变化,以探讨NSC治疗脊髓损伤的分子机制。[结果]:1.在3组进行BDA追踪实验的大鼠中,双侧大脑皮质注射10% BDA 0.5μL/位点,存活3w组的追踪效果最好。2.通过行为学,神经电生理等指标检测,确定大鼠脊髓全横断损伤动物模型构建成功;且进一步证实脊髓神经具有可塑性。3.NSC移植后大鼠的后肢功能BBB评分优于单纯脊髓全横断组。NSC移植后大鼠的皮层体感诱发电位(CSEP)、运动诱发电位(MEP)的潜伏期短于单纯脊髓全横断大鼠。电针刺激大脑皮质运动区发现NSC移植组大鼠双后肢出现明显收缩,且以对侧更为明显。说明NSC移植能促进大鼠感觉,运动行为与神经电生理功能的部分恢复。4.BDA神经束路追踪和5-HT、CGRP免疫组化染色结果显示,损伤脊髓头侧1-3节段的纤维数量明显减少,尤其是临近疤痕的节段。但随时间进程,脊髓存在有限的神经再生。而NSC移植能明显加强这种神经再生(与单纯脊髓全横断组比较)。5.NSC移植明显下调损伤位点头侧脊髓神经生长因子TGF-betal、CNTF和促凋亡基因Bax、CASPESE-3以及相关信号分子BAD的表达;同时明显上调凋亡抑制基因BCL-2的表达;但不改变细胞周期蛋白调控基因CDK4和CyclinD1、CyclinE和BDNF的表达。[结论]:1.BDA条件实验说明,本实验中所使用的BDA示踪剂(美国Molecular Probes公司)是有效的,在双侧大脑皮质上选择多点注射,以每个位点注射0.5μL的10%BDA,注射后大鼠存活3w为最佳的BDA追踪实验方案。2.脊髓全横断模型是成功的,所使用的手术方法是可行,有效的;此外,脊髓损伤后随时间延长,CST纤维有少量再生,说明脊髓具有神经可塑性。3.NSC移植能促进宿主感觉及运动传导功能的部分恢复。4.NSC移植可能通过影响神经再生、细胞凋亡,和调节NTF及信号转导通路分子的表达水平,来实现促进脊髓修复的目的。