螺旋藻酱油发酵工艺研究以及特征性成分检测

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螺旋藻富含蛋白质和多种生物活性成分,具有提高免疫力、抗氧化和抗肿瘤等多种功能,所以将其添加到酱油生产过程中,可以有效的提高酱油的营养价值和保健功能。本论文主要从制曲和发酵两个方面对高盐稀态发酵工艺进行了优化,并且在此基础上研究了螺旋藻的最优添加条件,从而获得螺旋藻酱油的酿造工艺,然后对自酿螺旋藻酱油的理化指标和特征性成分γ-亚麻酸的含量进行测定。首先通过单因素实验获得了最优制曲条件:豆粕:麸皮=2:3,加水量120%,121℃蒸煮30min后接种0.3%的耐盐米曲霉种曲,30℃制曲42h,该条件下制得的成曲各种酶活力都有所提高,酸性蛋白酶提高了2.3倍,淀粉酶活提高了40%。并且通过单因素实验和响应面实验优化了螺旋藻酶解条件,在加酶量10380U/g底物,酶解温度41.20℃条件下,酶解6.21h时,水解度可达到最高值71.11%。然后在此基础上通过一系列实验研究确定了螺旋藻酱油的酿造工艺:1)采用米曲霉与黑曲霉分别制曲,按4:1混合制醪进行发酵,发酵初期温度定为15℃,发酵25天后,升高温度至30℃恒温发酵,发酵周期为120天;2)在第5天时接种0.2%的乳酸菌,然后在第35天时接种1%的酵母菌,其中鲁氏酵母As2.180和球拟酵母As2.14按照1:1的比例进行添加;3)螺旋藻经过破壁处理后,在制醪时加入,加入量为3%。并且利用上述优化后的酿造工艺制得螺旋藻酱油,测定其常规理化指标,结果显示其氨基酸态氮含量达到0.937g/100ml,可溶性无盐固形物量为13.121g/100ml,藻胆蛋白含量0.231mg/ml,均达到国家一级酱油水平。最后确定了螺旋藻酱油特征性成分γ-亚麻酸的检测方法,采用乙醚提取粗脂肪酸,并用0.5mol/lKOH-甲醇溶液皂化,三氟化硼-甲醇溶液甲酯化后进行气相分析,并且通过实验验证了该方法的相对标准偏差在5%以内,且回收率范围都在95%-105%之间,该方法可行。通过该方法测得的自酿螺旋藻酱油的γ-亚麻酸含量为11.1mg/100ml。
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