论文部分内容阅读
趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4在胚胎发育、肿瘤细胞转移及介导免疫缺陷病毒(HIV)感染中发挥重要作用，最近又在动脉粥样硬化斑块中发现SDF-1α高表达，SDF-1α／CXCR4与动脉粥样硬化的关系已经引起重视。 本研究首先探讨SDF-1α对单核细胞的趋化作用，然后在Ox-LDL处理的血管平滑肌细胞和单核细胞上对SDF-1α／CXCR4的表达进行研究，最后对SDF-1α／CXCR4在单核细胞／血管平滑肌细胞黏附的作用进行研究。 目的：探讨SDF-1α对单核细胞趋化作用及其Ox-LDL、苦瓜蛋白对SDF-1α趋化单核细胞的影响；Ox-LDL对THP-1细胞CXCR4、rVSMC的SDF-1α表达的影响；SDF-1α／CXCR4对THP-1／rVSMC黏附的影响。 方法：用小室迁移试验来研究SDF-1α对单核细胞的趋化作用，将单核细胞或经Ox-LDL处理的单核细胞加入上室，在上、下室分别加入苦瓜蛋白、SDF-1α孵育10小时后计数各组下室迁移的细胞数。RT-PCR检测CXCR4或SDF-1α mRNA的表达，Western blot检测其蛋白表达变化，观察ox-LDL对THP-1细胞CXCR4、rVSMC的SDF-1α表达的剂量和时间效应。用免疫组化检测SDF-1α在颈总动脉套环兔模型中的表达变化。用静态黏附实验来研究THP-1／rSMC的黏附，原代培养的rVSMC与50μg／ml Ox-LDL孵育48h，将单核细胞与平滑肌细胞共孵育后洗脱检测黏附作用，并加用SDF-1α抗体阻断。 结果：SDF-1α呈浓度依赖性诱导单核细胞的迁移，加入CXCR4抗体可明显抑制这种作用。经不同浓度Ox-LDL处理48h后的THP-1细胞再用10ng／ml SDF-1α进行趋化时，结果发现Ox-LDL呈浓度依赖性的增加单核细胞的迁移，50μg／ml Ox-LDL组所迁移的细胞数是对照组的11倍。苦瓜蛋白则呈浓度依赖性的抑制单核细胞的迁移。THP-1细胞有基础水平的CXCR4表达，50μg／ml Ox-LDL可