【摘 要】
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目的:由人类免疫缺陷病毒(HIV-1或HIV-2)感染所致的艾滋病,是当今严重威胁人类生命健康的重大疾病,传播广泛迅速,病死率极高,至今尚无治愈方法;检测病毒抗原早期发现感染者,
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目的:由人类免疫缺陷病毒(HIV-1或HIV-2)感染所致的艾滋病,是当今严重威胁人类生命健康的重大疾病,传播广泛迅速,病死率极高,至今尚无治愈方法;检测病毒抗原早期发现感染者,益于对之早期治疗和严格监控,是遏制艾滋病发病和传播的有效手段。我国早期传入和流行的艾滋病毒是HIV-1,针对其代表性病毒抗原p24制备单克隆抗体(简称单抗)的研究已有报道;而近年发现我国也有HIV-2感染和传播,但尚无针对其代表性病毒抗原gp36制备单抗的报道。本研究的目的是,制备稳定产抗gp36基因工程抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株及相应单抗,鉴定细胞株的生物学特性和单抗的免疫学特性及理化特性;初步探索用所制单抗构建检测gp36 ELISA法的适用性;为早期发现HIV-2病毒感染者,提供可资应用的单抗和技术支撑。方法:用基因重组gp36抗原免疫BALB/c小鼠5次,第一次与第二次免疫间隔4周,其后每次免疫间隔2周,融合前三天gp36抗原尾静脉注射进行攻击。取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞株Sp2/0,用50%聚乙二醇(PEG)融合,HAT培养基选择培养出融合细胞。用gp36作为抗原包板,间接ELISA法,初筛分泌抗gp36抗体的融合细胞,有限稀释法克隆化培养获得稳定分泌抗gp36单抗的阳性杂交瘤细胞株。以体外连续传30代、液氮中冻存3个月后复苏,测定
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