不同芹菜品种对黄瓜上烟粉虱的防控及其机理探究

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烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)寄主植物多达74科600余种,但其对各寄主植物上的发生情况和为害状态并不一样,其嗜好的寄主主要有黄瓜、番茄、甘蓝、棉花、烟草等,但仍然有许多烟粉虱的弱选择性寄主植物可能对烟粉虱具驱避作用。在前人研究的基础上,作者于2011-2014年在中国农业大学昆虫生态实验室和河北省涿州市中国农业大学教学实验场选取了9个芹菜品种,利用直管嗅觉仪、Y型嗅觉仪和网室试验研究了其对Q型烟粉虱选择行为的影响;同时,在田间验证了间作这9个芹菜品种对黄瓜上烟粉虱的防控作用。进一步收集分析了不同品种芹菜的挥发物成分差异,找到了对烟粉虱有活性的三种化学物质,在室内进行了行为测定,探讨了其驱避烟粉虱的机理。最后,利用分子生物学的技术手段,对烟粉虱嗅觉相关蛋白做了初步研究,主要研究结果如下:(1)通过室内直管嗅觉仪试验、Y型嗅觉仪试验、网室试验和田间验证,结果显示9个芹菜品种对烟粉虱均有驱避作用,驱避效果较好的是尤文图斯、文图拉和津南实芹;最优驱避生育期是生长中期。(2)顶空固相微萃取-气谱质谱联用和顶空吸附洗脱-气谱质谱联用测定结果表明:不同挥发物采集方法对挥发物组成的鉴定产生较大影响,不同品种芹菜中对烟粉虱有驱避作用的活性物质可能主要包括β-Myrcene、D-Limonene和(E)-β-Ocimene。(3)3种化合物对烟粉虱行为选择影响测定结果表明:β-Myrcene和D-Limonene对烟粉虱有显著的驱避效果,而(E)-β-Ocimene对烟粉虱选择行为的影响与其浓度关系很大。综合分析表明:D-Limonene可能是西芹品种中驱避烟粉虱的主要活性物质,而P-Myrcene和D-Limonene的联合作用可能是本芹品种驱避烟粉虱的主因。(4)利用RNA提取、反转录合成cDNA等技术克隆得到了烟粉虱OBP基因全长, GenBank登录号为KJ188169,通过序列分析表明,两种生物型烟粉虱该OBP蛋白氨基酸序列在两种生物型烟粉虱中序列完全一致,进一步对该基因进行了原核表达和蛋白纯化及结合特性研究。(5)克隆得到了烟粉虱G蛋白Gαq和Gp1两个基因的全长,3enBank登录号分别为JQ922538和KC188671,通过序列分析表明这两个基因在两种生物型烟粉虱中序列完全一致。通过原核表达和抗体制备获得了两种蛋白的抗血清。(6)荧光定量PCR和western blot结果显示Gαq和Gβ1在烟粉虱不同生物型、不同发育期和不同部位中均有表达,是普遍存在的蛋白,在不同发育期转录水平有显著差异,在头部的表达水平显著高于胸部和腹部。
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