【摘 要】
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目的本研究通过结扎大鼠左前降支法建立心肌缺血/再灌注损伤模型,观察自噬蛋白Beclin-1和LC3在心肌缺血再灌注损伤中的表达,探讨自噬在心肌缺血再灌注损伤中的作用,在此基础上探讨诺欣妥对大鼠心肌缺血再灌注损伤后自噬的调控。方法取72只雄性大鼠随机分为假手术组(sham)、心肌缺血/再灌注组(I/R)、心肌缺血/再灌注+沙库巴曲/缬沙坦组(I/R+Entresto),每组各24只。分别于即刻、4周
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目的本研究通过结扎大鼠左前降支法建立心肌缺血/再灌注损伤模型,观察自噬蛋白Beclin-1和LC3在心肌缺血再灌注损伤中的表达,探讨自噬在心肌缺血再灌注损伤中的作用,在此基础上探讨诺欣妥对大鼠心肌缺血再灌注损伤后自噬的调控。方法取72只雄性大鼠随机分为假手术组（sham）、心肌缺血/再灌注组（I/R）、心肌缺血/再灌注+沙库巴曲/缬沙坦组（I/R+Entresto）,每组各24只。分别于即刻、4周、8周处死各组大鼠8只,取各组大鼠左室前壁心肌组织进行HE染色并观察形态改变,通过实时定量PCR及Western blotting技术检测各组大鼠心肌组织中Beclin-1及LC3的表达水平,应用统计学方法比较组内、组间、各时相上指标的改变,并分析其是否有统计学意义。结果1.各组大鼠心肌组织形态学的变化。Sham组心肌细胞染色均匀、排列整齐、纤维完整,无肿胀,炎性细胞浸润不明显。I/R组大鼠成模第4周取材的心肌组织损伤较即刻取材明显,第8周较第4周有所改善。I/R+Entresto组成模第4周取材的心肌组织形态改变较即刻取材好转,第8周较第4周好转。2.各组大鼠心肌组织中Beclin-1和LC3 m RNA及蛋白表达。组内比较:Sham组成模即刻、第4周、第8周取材之间,Beclin-1和LC3 m RNA及蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）。I/R组第4周Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平最高,高于即刻取材和第8周取材（P<0.05）,并具有时间效应,即第4周时Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平最高,而即刻取材与第8周取材Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平差异不具统计学意义（P>0.05）。I/R+Entresto组第4周取材Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平最高,高于即刻取材和第8周取材（P<0.05）,而第8周取材Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平低于即刻取材,差异有统计学意义（P<0.05）,并具有时间效应,即第4周时Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平最高。组间比较:与sham组相比,I/R组各时相的Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与sham组相比,I/R+Entresto组即刻取材和第4周取材Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）,而I/R+Entresto组第8周取材Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平与sham组差异无统计学意义。I/R+Entresto组即刻取材Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平与I/R组即刻取材相比,差异无统计学意义（P<0.05）,I/R+Entresto组第4周取材和第8周取材Beclin-1和LC3m RNA及蛋白的表达水平分别低于I/R组第4周取材和第8周取材,差异有统计学意义（P<0.05）。结论本研究在验证诺欣妥保护心肌缺血再灌注损伤的基础上,发现诺欣妥可以降低缺血再灌注中自噬体的过度激活,从而降低心肌缺血再灌注给心肌组织所带来的损伤,其机制可能与修复自噬流有关。综上所述,诺欣妥可能通过修复自噬流而保护缺血再灌注损伤后的心肌,并具有一定的时间效应。
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