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香蕉枯萎病是由镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)引起的维管束病害,是当前华南地区严重威胁香蕉生产的重要病害。应用具有寄生和抑制作用的土壤习居菌木霉菌来控制病害是一种有效和安全的防治方法。本实验室筛选出的木霉T1菌株在防治香蕉枯萎病中初步显示出理想的防治效果,尤其表现出良好的保苗作用。本论文接续研究了T1菌株固体发酵培养技术。通过平板试验筛选出最适合T1菌株生长和产孢的培养基,通过固体发酵试验筛选出了较适宜的培养物料,并对固体发酵条件进行了优化。明确了木霉T1生防菌株的生产发酵工艺。
本研究结果显示木霉T1菌株的培养,选择马铃薯综合培养基有利于菌落生长,选择马丁培养基则有利于产孢。T1菌株的扩大培养可利用麸皮、玉米秆粉、棉籽壳、木屑等作为发酵基质,但以质量比2:1的麸皮木屑作为培养料生长速率最高。在发酵温度28℃时,瓶装量15g/250mL,加水量为2mL/g干料、孢子悬浮液浓度108个/mL和接种量为2mL时可获得最佳的固体发酵产孢量。
本研究以木霉孢子萌发率和干燥效果作为检测指标,通过单因子试验明确了进风温度和进料量的设置范围。再以助干剂种类、助干剂含量、进风温度和进料量4因素设计L9(34)正交试验,获得了喷雾干燥法制备活性木霉孢子粉的最佳工艺组合。试验结果表明5%的β-环糊精作为助干剂、喷雾干燥机的进风温度为110℃和进料量为10%时,产品中活性孢子含量最高。10%的β-环糊精作为助干剂、喷雾干燥机的进风温度为130℃和进料量为5%时,干燥情况良好且产率高。
本实验通过单因素试验证明木霉滴丸制剂加工的可行。并以正交试验明确了以PEG2000+PEG4000(1:1)为基质,以0.1%水杨酸为防腐剂,原药木霉T1孢子液的温度为55℃、冷凝剂-液体石蜡温度为0℃和木霉孢子悬浮液与基质比例为2:10时,制备的滴丸剂外观成型效果最好,木霉孢子悬浮液与基质比例为1:10时,生防活性最优。本研究将喷雾干燥技术和滴丸成型技术用于木霉生防活性孢子剂的制备,为生防木霉新剂型的制备和生产工艺技术提供了依据。