论文部分内容阅读
蛭弧菌为一类可裂解其他细菌的寄生性革兰氏阴性菌，对水产养殖病原菌具有良好的清除效果，有一定的发展前景，但目前仍存在诸多问题，限制了其推广应用。
为获得盐度适用范围广的蛭弧菌，本文以一株枯草芽孢杆菌为宿主，采用双层平板法，自广东一浅滩养殖水域分离获得目标菌株BDN-1。对其进行了形态学及16SrDNA分析，鉴定为Bdellovibriosp.BDN-1；对其进行了基本的生物学特性分析，阐明了其广盐性特征，并发现Bdellovibriosp.BDN-1仅能利用活的宿主菌。
为增强蛭弧菌裂解能力，本文采用Co60辐照诱变技术作用于蛭弧菌BDN-1，通过两轮突变，分别筛选到突变株BDN-1F1和BDN-1F2。通过对30株水产养殖常见致病菌的裂解研究，发现突变株BDN-1F2的裂解率达90%，具较强的裂解能力。通过与V.harveyi-Y和V.parahaemolyticus-G的共培养实验，研究了突变株BDN-1F1和BDN-1F2对两株弧菌的控制作用，发现突变株BDN-1F2可显著降低两株弧菌的浓度(P＜0.05)。
为提高蛭弧菌蛭质体浓度以利保质，本文研究了谷氨酸钠、放线菌酮、Ca2+与Mg2+、氨苄青霉素和吲哚对蛭弧菌蛭质体形成的影响。发现仅放线菌酮明显抑制蛭弧菌蛭质体形成，其他因素均可促进蛭质体形成。在单因素实验基础上，设计了正交试验，得到各因素相互作用的最佳组合：谷氨酸钠为5mmol/L、Ca2+和Mg2+为20mmol/L和10mmol/L、吲哚为1mmol/L。
最后，本文利用高通量测序技术研究了蛭弧菌突变株BDN-1F2对凡纳滨对虾苗肠道菌群结构的影响。发现蛭弧菌显著降低了虾苗肠道及其养殖水体中可培养细菌(TCBC)数量(P＜0.05)；Alpha多样性分析结果表明，蛭弧菌提高了对虾苗肠道菌群的Chao1指数、ACE指数和Shannon指数；对虾苗肠道菌群结构丰度热图分析结果表明，蛭弧菌有效控制了对虾苗肠道中有害菌的生长，促进了潜在有益菌群的繁殖。高通量测序研究结果说明，蛭弧菌提高了对虾苗肠道菌群的物种多样性和微生物群落的丰度，调节了对虾苗肠道微生态系统的平衡，有利于对虾苗的生存。
为获得盐度适用范围广的蛭弧菌，本文以一株枯草芽孢杆菌为宿主，采用双层平板法，自广东一浅滩养殖水域分离获得目标菌株BDN-1。对其进行了形态学及16SrDNA分析，鉴定为Bdellovibriosp.BDN-1；对其进行了基本的生物学特性分析，阐明了其广盐性特征，并发现Bdellovibriosp.BDN-1仅能利用活的宿主菌。
为增强蛭弧菌裂解能力，本文采用Co60辐照诱变技术作用于蛭弧菌BDN-1，通过两轮突变，分别筛选到突变株BDN-1F1和BDN-1F2。通过对30株水产养殖常见致病菌的裂解研究，发现突变株BDN-1F2的裂解率达90%，具较强的裂解能力。通过与V.harveyi-Y和V.parahaemolyticus-G的共培养实验，研究了突变株BDN-1F1和BDN-1F2对两株弧菌的控制作用，发现突变株BDN-1F2可显著降低两株弧菌的浓度(P＜0.05)。
为提高蛭弧菌蛭质体浓度以利保质，本文研究了谷氨酸钠、放线菌酮、Ca2+与Mg2+、氨苄青霉素和吲哚对蛭弧菌蛭质体形成的影响。发现仅放线菌酮明显抑制蛭弧菌蛭质体形成，其他因素均可促进蛭质体形成。在单因素实验基础上，设计了正交试验，得到各因素相互作用的最佳组合：谷氨酸钠为5mmol/L、Ca2+和Mg2+为20mmol/L和10mmol/L、吲哚为1mmol/L。
最后，本文利用高通量测序技术研究了蛭弧菌突变株BDN-1F2对凡纳滨对虾苗肠道菌群结构的影响。发现蛭弧菌显著降低了虾苗肠道及其养殖水体中可培养细菌(TCBC)数量(P＜0.05)；Alpha多样性分析结果表明，蛭弧菌提高了对虾苗肠道菌群的Chao1指数、ACE指数和Shannon指数；对虾苗肠道菌群结构丰度热图分析结果表明，蛭弧菌有效控制了对虾苗肠道中有害菌的生长，促进了潜在有益菌群的繁殖。高通量测序研究结果说明，蛭弧菌提高了对虾苗肠道菌群的物种多样性和微生物群落的丰度，调节了对虾苗肠道微生态系统的平衡，有利于对虾苗的生存。