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目的:采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS方法快速筛选扁柏双黄酮和雷公藤红素在大鼠体内外的代谢产物。为了提高扁柏双黄酮和雷公藤红素的溶解性和抗肿瘤作用,采用薄膜水化法分别制备扁柏双黄酮和雷公藤红素的纳米胶束,并进行体内外评价。方法:采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术进行数据采集,通过比较分析体内外样品的质谱信息,结合母药的裂解规律推测扁柏双黄酮和雷公藤红素的代谢物结构。基于扁柏双黄酮和雷公藤红素溶解性差的性质,分别以soluplus/维生素E聚乙二醇琥珀酸酯（TPGS）/地喹氯铵（DQA）为纳米材料制备了载药纳米胶束,并进行理化性质、稳定性及临界胶束浓度的考察。以A549细胞为模型,采用CCK-8法考察了载药纳米胶束和原药的体外细胞毒性。采用流式细胞术评价了载药纳米胶束和原药对A549细胞的线粒体膜电位和活性氧生成量的影响。建立A549荷瘤裸鼠模型,灌胃药物后定期观察肿瘤体积、小鼠体重和肿瘤重量的变化。采用免疫组化染色法考察载药胶束和原药引起肿瘤组织中Bax、Bcl-2和Caspase-3产量变化。结果:通过UHPLC-Q-TOF-MS/MS方法共鉴定了66种扁柏双黄酮体内外代谢物,41种体内代谢物（血浆中8种,胆汁中10种,尿液中12种,粪便中25种）和49种体外代谢物（大鼠肝微粒体中15种,大鼠肠道菌群中47种）。通过UHPLC-Q-TOF-MS/MS方法共检测了43种雷公藤红素体内外代谢物,26种体内代谢物（血浆中4种,胆汁中13种,尿液中11种,粪便中19种）和28种体外代谢物（大鼠肝微粒体中9种,大鼠肠道菌群中24种）。扁柏双黄酮纳米胶束的平均粒径为65.58±0.66nm,粒径分布窄（PDI=0.06±0.01）,zeta电位为2.34±0.21 m V,包封率和载药量分别为91.56%±0.73%和2.23%±0.02%。雷公藤红素纳米胶束的平均粒径为60.92±0.72 nm,PDI是0.06±0.01,zeta电位是2.96±0.46 m V。包封率和载药量分别为99.26%±0.17%,4.72%±0.01%。考察两种载药纳米胶束30天内的稳定性,显示稳定性良好。扁柏双黄酮纳米胶束和雷公藤红素纳米胶束的临界胶束浓度分别为5.55×10-4 mg/m L和6.76×10-4 mg/m L。相比于原药,载药纳米胶束诱导产生更多的活性氧生成,更大程度地降低线粒体膜电位,表现出更强的细胞毒性。体内评价结果表明,载药纳米胶束能够显著地抑制肿瘤的生长,导致肿瘤细胞产生更多的Bax和caspase-3,更少的Bcl-2,更明显地诱导肿瘤细胞凋亡。结论:UHPLC-Q-TOF-MS/MS方法简便快速,灵敏度高,可用于检测扁柏双黄酮和雷公藤红素的体内外代谢产物,有助于了解其生物转化和代谢机制,为其进一步的药理学和毒理学研究奠定基础。成功构建了soluplus/TPGS/DQA为纳米材料的载药纳米胶束,制成的纳米胶束与原药相比,显著提高了溶解性和抗肿瘤活性。