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[目的]分析p16/Ki-67双染色检测宫颈高级别上皮内病变的敏感性、特异性,探讨p16/Ki-67双染在子宫颈癌筛查中的应用价值。[方法]回顾性分析共359例2017年1月至2018年10月在无锡市妇幼保健院进行子宫颈癌筛查的患者,所有样本均采用p16/Ki-67免疫细胞化学双染色、液基细胞学和高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测,每个病人的诊断通过组织病理学检查证实。[结果](1)p16/Ki-67双染检测出CIN2及以上病变(CIN2+)的敏感性为89.73%(95%CI:83.59%-95.30%),特异性为 68.75%(95%CI:55.35%-78.79%),阴性预测值为 70.97%(95%CI:61.45%-84.05%),阳性预测值为 88.72%(95%CI:84.23%-94.69%),特异性高于细胞学(39.58%,p=0.02),且明显高于高危型HPV检测(22.92%,p=0.01),三者的敏感性相似(p>0.05);(2)在 ASC-US 和 LSIL 病例中,p16/Ki-67双染色的特异性显著高于HPV检测(65.12%vs11.63%,p<0.05),其对CIN2+检测的敏感性与HPV检测相似;(3)HR-HPV 阳性患者双染色检测CIN2+的敏感性和特异性分别为89.85%和69.81%,高于细胞学(82.79%和42.18%)和HPV16/18检测(70.45%和 44.59%)。[结论](1)p16/Ki-67双染色可提高宫颈高级别上皮内病变检测的特异性,与HPV检测CIN2+的敏感性相似;(2)在对ASC-US或LSIL液基细胞学进行分流时,与HR-HPV 阳性相比,p16/Ki-67双染色可增加CIN2+病灶检测的特异性;(3)高危HPV筛查患者的筛查管理中,p16/Ki-67双染色与细胞学筛查相比可提高灵敏度和特异性,减少误诊,p16/Ki-67双染色可避免过度诊断和治疗。