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表面增强拉曼光谱技术是近年来快速发展的一种痕量特征标记性物质检测技术,达到了分子识别水平,具有很高的灵敏度,能够精确地分析和了解物质结构和成分,它根据疾病能引起人体组织、血液、分泌物的分子结构、组成的变化,进而影响其光谱谱型、峰位、峰高,在分子水平上来诊断疾病。相对于其它诊断手段,拉曼光谱技术用于医学诊断具有非破坏性、非侵入性、快速、测量条件要求低、可重复性好、无污染等优点;人体唾液中含有大量体征相关的特异性蛋白质和分泌物质。唾液检测具有无创、获取方便、适合开展大规模普查等优点。表面增强拉曼光谱检测技术可以快速地对唾液进行检测,二者的结合,有可能成为一种癌症早期诊断的新方法。早期诊断对于癌症患者的有效治疗,延长生命具有十分重要的意义,特别是肝癌具有较隐匿,高度恶性,进展快,易转移等特点,肝癌患者确诊时大都已到晚期,实现早期诊断可提高其生存率。常规检测手段存在敏感性不高、特异性不强、准确性差等缺点,表面增强光谱技术的出现,为癌症的早期诊断提供了新的手段。但是,目前研究者较集中于对癌症患者的病理切片、组织细胞进行光谱分析,本文利用表面增强光谱技术对肝癌患者进行实验研究,通过对肝癌患者唾液、血清的采集、样品的处理、光谱的采集及光谱分析,肝癌特异性标记物AFP(alpha fetoprotein)的检测及分析等过程得到肝癌相关特征信息,以期达到肝癌早期诊断、辅助诊断的目的,主要内容如下:
1.对肝癌患者及正常人的唾液及血液样本进行了采集及处理。
2.利用表面增强拉曼光谱技术对肝癌患者及正常人的唾液样本进行检测,并进行光谱分析,建立了肝癌患者唾液样本的实验模型,对该模型系统分析可为肝癌诊断提供辅助依据。
3.利用表面增强拉曼光谱技术对肝癌患者及正常人的血清样本进行检测,并进行光谱分析,建立了肝癌患者血清样本的实验模型,对该模型进行研究并与唾液样本的模型进行比对分析,为利用对唾液的拉曼光谱检测进行肝癌早期诊断提供信息。
5.对肝癌患者及正常人唾液样本的拉曼光谱数据进行统计处理及分析,结果表明肝癌患者与正常人的唾液样本分类良好,灵敏度及特异性较好。
6.对肝癌患者及正常人血液样本的拉曼光谱数据进行统计处理及分析,结果表明肝癌患者与正常人的血清样本能够很好的区分,灵敏度及特异性较好。
7.为了探索引起肝癌患者唾液的拉曼特征峰的物质基础,对肝癌特异性标记物甲胎蛋白AFP进行表面增强拉曼光谱的检测,并进行光谱分析,进一步验证了AFP抗原的分子组成,且AFP抗原的拉曼强度基本随浓度的递增呈递减趋势。
8.对肝癌患者的唾液样本、血液样本及AFP抗原的拉曼光谱进行比对分析,提示利用表面增强拉曼光谱检测唾液有可能诊断早期癌症。