沉默Oct4、Nanog基因抑制胰腺癌干细胞干性特性的研究

来源 :南通大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wangyaofengw
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目的通过特异shRNA沉默胰腺癌PANC-1肿瘤干细胞(PCSCs)中Oct4和Nanog的表达,研究PCSCs干性特征的变化及其机制。方法1.从PANC-1细胞株中分离出CD44+CD24+ESA+PCSCs,检测Oct4、Nanog基因和蛋白的表达;用慢病毒载体介导的shRNA沉默PCSCs中Oct4、Nanog的表达,并用FQRT-PCR和Western blot检测干扰效率。2.通过单克隆形成实验、Transwell小室模型、CCK8法检测Oct4、Nanog对PCSCs增殖、迁移、侵袭和药物敏感性的影响;FQRT-PCR和Western blot探讨其作用机制。3.NOD/SCID小鼠致瘤实验观察Oct4、Nanog对PCSCs致瘤性的影响。结果1. PANC-1细胞株中PCSCs占0.1-0.8%,Oct4和Nanog在PCSCs中呈高表达(P<0.05);慢病毒载体介导的shRNA明显降低了PCSCs中Oct4、Nanog的表达(P<0.05)。2.沉默Oct4、Nanog后,PCSCs的单克隆形成、增殖、迁移、侵袭能力较对照组明显下降,药物敏感性增强并诱导凋亡(P<0.05)。3.致瘤实验表明沉默Oct4和Nanog后,PCSCs致瘤能力较对照组明显下降(P<0.05)。结论1. Oct4、Nanog在PCSCs中高表达,慢病毒介导的shRNA可沉默PCSCs中Oct4、Nanog的表达。2.沉默PCSCs中Oct4、Nanog的表达,可抑制其干性特征,增强药物敏感性并诱导凋亡。3.靶向干预PCSCs中Oct4、Nanog基因为胰腺癌的治疗提供实验基础和理论依据。
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