O型口蹄疫病毒VP1基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达

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口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种严重危害猪、牛、羊等多种偶蹄动物的急性、烈性传染病。该病发病率高,传染性强,对畜牧业生产、肉食品供应、家畜及其产品的国际贸易造成重大影响,历来受到各国政府的高度重视,世界动物卫生组织将其列为动物A类疫病之首,我国将其列为一类动物疫病。 我国周边国家口蹄疫疫情非常严重,自上世纪90年代,O型口蹄疫病毒“泛亚”毒群在亚洲地区的泛滥,对我国口蹄疫的防控措施提出了严峻的挑战。目前,我国主要采取免疫接种O型口蹄疫灭活疫苗为主的综合防控措施,因此,疫苗的免疫效果成为预防此病的关键。口蹄疫病毒的VP1蛋白是诱导中和抗体及激发保护性免疫应答的主要抗原蛋白。因此,利用基因工程技术体外表达重组VP1蛋白可用于口蹄疫病毒免疫抗体水平的检测。目前,国内外许多研究学者已在大肠杆菌中成功地表达了口蹄疫病毒的VP1基因,尽管表达效率较高,但由于重组蛋白的纯化比较困难,且残留的大肠杆菌抗原成分会与动物体内的大肠杆菌抗体发生非特异性反应,因此很难在实际中得到应用。 本研究成功地在Sf9昆虫细胞中表达了O型口蹄疫病毒VP1蛋白,利用VP1蛋白单克隆抗体在细胞水平上检测重组VP1蛋白,结果表明重组VP1蛋白特异性地在胞浆内表达。利用ELISA方法对重组蛋白进行活性鉴定,结果表明重组VP1蛋白具有较好的反应活性,且表达的重组蛋白与血清中存在的其他抗体成分不存在交叉反应,因此将其用于口蹄疫免疫抗体水平检测具有良好的应用前景。
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