丹东蒲公英TaMYB59基因对胁迫的响应

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MYB转录因子在植物的生长发育和次生代谢调控中具有重要作用,然而蒲公英中MYB转录因子尚未见文献报道。本试验从丹东蒲公英中克隆获得TaMYB59转录因子,对TaMYB59转录因子进行初步研究评价。试验具体结果如下:1.克隆扩增获得了TaMYB59转录因子基因序列,开放阅读框(ORF)大小为732bp,编码243个蛋白质的基因,命名为TaMYB59。该转录因子有保守结构域R2和R3结构域,是典型的R2R3-MYB家族基因的成员。2.利用qRT-PCR方法对TaMYB59基因表达量进行初步探究,结果显示:组织特异性分析结果显示TaMYB59在丹东蒲公英中花部位的表达量最高。在盐胁迫、水杨酸处理后TaMYB59基因表达量具有先增加后降低的趋势,盐胁迫处理3h后达与对照组相比提高了22倍,水杨酸处理后3h达到了14倍,而茉莉酸甲酯处理后,TaMYB59的相对表达量差异不显著。3.利用生物信息学方法对TaMYB59基因进行分析,构建原核表达载体pCold-TaMYB59,SDS-PAGE确定获得的TaMYB59重组蛋白大小为78KDa,与预测大小符合。对TaMYB59蛋白进行亚细胞定位分析,构建了35S-TaMYB59-GFP的表达载体,结果表明TaMYB59蛋白定位于细胞核。4.分析ANS基因启动子,其上含有6个MBS顺式作用原件。构建了AD-TaMYB59和pAbAi-proTaANS载体,酵母单杂交结果显示AD-TaMYB59能与MBS顺式作用原件进行结合。
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