耐碳青霉烯阴沟肠杆菌耐药性分析与分子特征性研究

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目的:了解耐碳青霉烯类抗菌药物阴沟肠杆菌的耐药情况、微生物特点及耐药机制,为临床治疗提供有效的防治措施和合理的用药依据。方法:收集2013年1月-2016年12月临床标本中分离出866株阴沟肠杆菌,使用纸片扩散法(K-B法)对这些菌株进行药物敏感性试验,按照CLSI标准对耐药结果进行分析,筛选出了21株对碳青霉烯类抗菌药物耐药的阴沟肠杆菌。对21株耐碳青霉烯类的阴沟肠杆菌进行改良Hodge试验,使用聚合酶链反应(PCR)技术对碳青霉烯酶耐药基因和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因进行检测,并使用WHONET 5.6软件对药敏结果进行分析。结果:2013年-2016年阴沟肠杆菌在革兰氏阴性菌中的检出率分别为9.6%(317/3308)、8.8%(218/2470)、8.2%((174/2114)、5.6%(157/2726),呈现出下降趋势;菌株的来源主要以痰液、伤口分泌物和分泌物为主,其构成比分别为48.3%(418/866)、16.7%(145/866)和11.0%(95/866);菌株主要分布在烧伤科和呼吸科,其构成比分别为17.7%(153/866)和15.0%(130/866);抗菌药物敏感性试验结果显示,阴沟肠杆菌对氨苄西林、头孢西丁、头孢唑林的耐药率高于90%,阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦的耐药率高于85%,哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率低于30%,三代头孢和喹诺酮类抗菌药物的耐药率低于55%,氨基糖苷类抗菌药物的耐药率低于35%,氨曲南的平均耐药率为38.1%,碳青霉烯类抗菌药物的耐药率较低。改良Hodge试验结果呈阳性的菌株有6株,其阳性率为28.6%(6/21)。耐药基因检测结果显示,碳青霉烯酶基因呈阳性的菌株有6株,其阳性率为28.6%,其中含NDM-1基因的菌株有1株(4.8%),含IMP基因的菌株有4株(19.0%),含KPC基因的菌株有2株(9.5%),在菌株中没有检测出VIM基因和SME基因;多数耐碳青霉烯的阴沟肠杆菌都是多重耐药的,产ESBLs的菌株阳性率为38.1%(8/21),其中CTX-M基因的阳性率为9.5%(2/21),SHV基因的阳性率为9.5%(2/21),TEM基因阳性率为19.0%(4/21)。结论:1.耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌菌株的检出率为2.4%,需要引起医院和临床医生的广泛重视。2.阴沟肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药率呈下降趋势,但对一二代头孢菌素类抗菌药物表现出较高的耐药率,对三四代头孢菌素类抗菌药物的耐药率相对较低。3.耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌中含有多种耐药基因,较常见的是碳青霉烯酶耐药基因和ESBLs耐药基因。4.碳青霉烯酶耐药基因中以IMP基因的比例最高,而ESBLs耐药基因中以TEM基因的比例最高。
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