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糖尿病是一组以高血糖为特征的慢性、全身性代谢疾病,如果不尽早治疗,会发生严重的并发症。糖尿病发生的直接原因是胰岛素绝对或者相对不足。胰岛素是治疗糖尿病的重要药物,I型糖尿病依赖胰岛素来维持生命,II型糖尿病也经常需要使用胰岛素来控制血糖。随着糖尿病发病人数的增多,对胰岛素的需求量也越来越大。人胰岛素是由51个氨基酸残基组成的双链多肽。胰岛素产品来源包括最早的从动物胰腺提取的天然胰岛素,以及近年来利用大肠杆菌和酵母等微生物生产的重组人胰岛素等。在植物生物反应器中表达重组人胰岛素也有相关报道,但技术尚不成熟,不能进行大规模生产。本研究尝试以拟南芥为模式植物,利用植物油体表达系统生产重组人胰岛素。首先,用合成的小人胰岛素原基因(mins)构建了植物种子特异性表达载体op::og-mins-2300-twin。为了方便后期蛋白的检测和纯化,对其进行了突变,在mins的C肽中加入一段由7个组氨酸组成的histag,得到变异小人胰岛素基因(MF),并构建了最终使用的植物种子特异性表达载体op::og-MF-2300-twin。然后,通过农杆菌介导的花粉管导入法侵染了拟南芥,得到8个能产生后代的独立阳性株系。最后,对转基因拟南芥进行了分子检测:1)DNA PCR和Southern杂交结果证明目的基因已经正确的插入到拟南芥基因组中,其中MF5株系中有2个基因拷贝,MF9株系中有5个基因拷贝。2)RT-PCR结果表明目的基因在拟南芥各个株系中都有转录,以MF9株系的转录量最高,而目的基因在转基因拟南芥的叶片中也有较弱的转录,可以进行进一步的研究。3)SDS-PAGE和Western杂交结果证明了目的蛋白在拟南芥种子中已经得到表达。本研究在已发表文献提供方法的基础上,总结和改进了在植物油体系统中表达重组人胰岛素的技术,并成功在拟南芥种子中进行了表达,得到含有油体蛋白-重组人胰岛素融合蛋白的拟南芥种子,可供进一步的纯化和活性实验使用。