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目的建立检测人磷脂酶A2受体抗体（PLA2R-Ab）的ELISA方法和评价PLA2R-Ab的临床应用价值。
方法以纯化的重组磷脂酶A2受体蛋白作为包被抗原制备反应板，通过优化抗原包被浓度、抗体稀释倍数、最佳封闭液及各步骤作用时间等，建立间接ELISA检测人磷脂酶A2受体抗体的方法学，评估性能；再收集临床标本，评价临床应用效能。
结果建立人磷脂酶A2受体抗体的间接ELISA法，对抗原包被浓度、抗体稀释倍数、封闭液及作用时间等步骤进行优化，最终确定为：重组抗原最适包被浓度为2.5?g/ml,室温3小时再4℃过夜包被；封闭液是10%BSA+10%山羊血清+PB，封闭条件为37℃2小时；血清标本稀释度为l：101，室温（18-25℃）放置120分钟；酶标二抗浓度1:10000，室温（18-25℃）放置45分钟；底物TMB室温显色l0分钟。检测方法学性能指标为：批内变异系数为1.95%、批间变异系数为2.9%，特异性高，无交叉反应。本方法与欧盟诊断试剂盒定性结果比对，阳性符合率为91%，阴性符合率100%,总符合率95.5%。PLA2R-Ab诊断特发性膜性肾病（IMN）的AUCROC为0.876，诊断临界值为12.85RU/ml；抗体水平与尿蛋白量（r=-0.127，P=0.475）、血浆白蛋白（r=-0.276，P=0.114）、尿红细胞计数（r=-0.066，P=0.711）均未显示相关关系。5例PLA2R-Ab阳性IMN患者接受免疫抑制治疗后，尿蛋白及血浆白蛋白改善（P＜0.05），抗体水平下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论磷脂酶A2受体抗体的ELISA方法具有很好检测性能，灵敏度高，特异性好，具有较好的稳定性和检测范围，能满足临床需求，该检测方法学在膜性肾病诊断和治疗中具有非常重要应用价值。
方法以纯化的重组磷脂酶A2受体蛋白作为包被抗原制备反应板，通过优化抗原包被浓度、抗体稀释倍数、最佳封闭液及各步骤作用时间等，建立间接ELISA检测人磷脂酶A2受体抗体的方法学，评估性能；再收集临床标本，评价临床应用效能。
结果建立人磷脂酶A2受体抗体的间接ELISA法，对抗原包被浓度、抗体稀释倍数、封闭液及作用时间等步骤进行优化，最终确定为：重组抗原最适包被浓度为2.5?g/ml,室温3小时再4℃过夜包被；封闭液是10%BSA+10%山羊血清+PB，封闭条件为37℃2小时；血清标本稀释度为l：101，室温（18-25℃）放置120分钟；酶标二抗浓度1:10000，室温（18-25℃）放置45分钟；底物TMB室温显色l0分钟。检测方法学性能指标为：批内变异系数为1.95%、批间变异系数为2.9%，特异性高，无交叉反应。本方法与欧盟诊断试剂盒定性结果比对，阳性符合率为91%，阴性符合率100%,总符合率95.5%。PLA2R-Ab诊断特发性膜性肾病（IMN）的AUCROC为0.876，诊断临界值为12.85RU/ml；抗体水平与尿蛋白量（r=-0.127，P=0.475）、血浆白蛋白（r=-0.276，P=0.114）、尿红细胞计数（r=-0.066，P=0.711）均未显示相关关系。5例PLA2R-Ab阳性IMN患者接受免疫抑制治疗后，尿蛋白及血浆白蛋白改善（P＜0.05），抗体水平下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论磷脂酶A2受体抗体的ELISA方法具有很好检测性能，灵敏度高，特异性好，具有较好的稳定性和检测范围，能满足临床需求，该检测方法学在膜性肾病诊断和治疗中具有非常重要应用价值。