组织蛋白酶K的过量表达是导致代谢性骨病的的主要原因,有效抑制组织蛋白酶K的活性可以充分预防和治疗因组织蛋白酶K的过表达而造成的组织损伤,进而达到预防和治疗疾病的目的,因此组织蛋白酶K已成为骨代谢性疾病的重要作用靶标。本课题利用组织蛋白酶K具有降解Ⅰ型胶原蛋白的特性和我国传统的中药资源优势,从中药的化学成分中筛选出特异性抑制组织蛋白酶K活性的选择性抑制剂；筛选出有效的、低毒的和低成本的治疗骨代谢疾病的新型药物的先导化合物,以便用于骨代谢类疾病的预防和治疗。本课题利用毕赤酵母真核表达成功人源的组织蛋白酶K,在体外用胃蛋白酶将目的蛋白激活后,有活性的蛋白利用荧光定量分析法测得组织蛋白酶K的酶活力为119.6u。本实验筛选出对组织蛋白酶K活性无影响的乙醇溶剂的浓度不高于1%,同时筛选出组织蛋白酶K的有效抑制剂-杨梅素,得出其IC50为585.3μmol/L.采用Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎的动物模型进行杨梅素的体内效果评价,结果显示杨梅素能够通过抑制骨吸收的活性而显著改善关节炎小鼠的临床症状,降低小鼠的关节软骨损伤。因此,杨梅素为制备预防和治疗由组织蛋白酶K降解胶原蛋白引起的骨质疏松和关节炎等骨代谢疾病的候选药物,是极具有开发应用价值的活性化合物。