红景天苷基于P38MAPK/NF-KBp65通路对肺纤维化的作用机制研究及中医探讨

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhusanhuiit
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目的:通过探究红景天苷对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞MRC-5胶原蛋白、相关炎性细胞因子及蛋白表达,探究红景天苷对相关炎性通路的调控作用,探讨红景天苷是否通过抑制炎症而减轻肺纤维化,进一步佐证具有益气活血作用的药物抗肺纤维化的作用及作用途径,并从肺络失和角度对肺纤维化发生的病机进行探讨,为临床应用益气活血治法或者益气及活血化瘀类中药治疗肺纤维化提供疗效评价和理论支持。  方法:以人胚肺成纤维细胞MRC-5为研究对象,进行体外培养24h,实验分为四组,空白组,对照组为TGF-β1干预组,实验组分别为红景天苷+TGF-β1组与TGF-β1+红景天苷组。细胞复苏和传代后,应用不同浓度梯度的红景天苷干预MRC-5细胞,通过CCK法检测红景天苷对细胞增殖影响,确定红景天苷的IC10对应浓度,并做为后续药物实验浓度。24h后用West blot方法检测HMGB1、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达,用RT-PCR方法检测P38mRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA的表达,用免疫荧光法检测胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、NF-κBp65蛋白的表达,最后进行统计分析。  结果:与空白组相比,对照组胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、NF-κBp65、HMGB1、IL-1β、IL-6、TNF-α、P38mRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA表达增加;而红景天苷+TGF-β1组和TGF-β1+红景天苷组与对照组相比,都显示出了抑制胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、NF-κBp65、IL-1β、IL-6、TNF-α、P38mRNA、IL-1βmRNA、IL-6mRNA的合成,而且红景天苷+TGF-β1组抑制作用优于TGF-β1+红景天苷组;对于HMGB1的表达,只有红景天苷+TGF-β1组显示有抑制效果,TGF-β1+红景天苷组显示并无抑制效果。  结论:红景天苷抑制TGF-β1诱导的MRC-5细胞胶原蛋白、炎性细胞因子及蛋白的表达与P38MAPK/NF-KBp65通路相关,红景天苷可以通过抑制炎症反应而减轻肺纤维化,而且红景天苷抑制炎症反应及蛋白表达的效果早期优于晚期,提示红景天苷对抑制炎症反应具有预保护作用。
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