大鼠急性脊髓损伤后移植人羊膜间充质干细胞对诱导型一氧化氮合酶表达的影响

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目的探讨移植人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,h AMSCs)对急性脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)大鼠的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)表达的影响。方法将36只体重为250g~300g的雌性成年SD大鼠随机分为3个实验组,每组包含12只个体,3组分别命名为假手术组(Sham组)、对照组(SCI组)和细胞移植组(h AMSCs组);仅对Sham组行椎板切除术暴露脊髓而未致伤脊髓,SCI组和h AMSCs组均采用改良Allen’s方法建立大鼠急性脊髓损伤模型;对SCI组于脊髓损伤部位注射磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS),而对h AMSCs组于脊髓损伤部位注射h AMSCs悬液;各组大鼠于术后第4d取其尾静脉血后,麻醉处死采集脊髓组织样本,对脊髓样本分别采用免疫蛋白印记(Western Blot,WB)和免疫组织化学染色法(immunohistochemistry,IHC)检测脊髓中i NOS蛋白表达情况,对血液样本采用硝酸还原酶法测定血液中一氧化氮(nitric oxide,NO)的浓度。结果Western Blot和IHC均显示与Sham组相比,SCI组和h AMSCs组i NOS蛋白表达明显升高(P<0.05),且h AMSCs组i NOS蛋白表达低于SCI组(P<0.05);IHC结果显示免疫阳性显色位于神经细胞和星型胶质细胞胞质内,广泛分布于脊髓灰质前脚、后脚及中央管周围,脊髓白质内也可见少量阳性显色;血液NO含量三组中Sham组最低(P<0.05),SCI组和h AMSCs组含量高,且SCI组高于h AMSCs组(P<0.05)。结论大鼠脊髓急性损伤后移植人羊膜间充质干细胞能够降低诱导型一氧化氮合酶的表达,进而减少伤后一氧化氮的生成,降低其在血液中的含量,对大鼠急性脊髓损伤后的神经组织继发性炎性病理过程具有可能的影响作用。
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