【摘 要】
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成纤维细胞生长因子(FGF)是一类来源于中胚层和神经外胚层的多种类型的具有广泛生物活性的细胞生长因子。到目前为止,发现FGFs超家族共有23个成员。成纤维细胞生长因子23,是成纤维细胞生长因子超家族中19亚家族的一员,也是最新发现的,它是磷、维他命D与甲状旁腺素的重要调节因子。血液中的FGF23主要是由成骨细胞产生的,它能远距离调节肾脏中的物质代谢,具有内分泌激素的特征,这一点使其区别于其他大多数
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成纤维细胞生长因子(FGF)是一类来源于中胚层和神经外胚层的多种类型的具有广泛生物活性的细胞生长因子。到目前为止,发现FGFs超家族共有23个成员。成纤维细胞生长因子23,是成纤维细胞生长因子超家族中19亚家族的一员,也是最新发现的,它是磷、维他命D与甲状旁腺素的重要调节因子。血液中的FGF23主要是由成骨细胞产生的,它能远距离调节肾脏中的物质代谢,具有内分泌激素的特征,这一点使其区别于其他大多数成纤维细胞生长因子。目的:将成纤维生长因子23(FGF23)的核心区与小分子泛素样修饰蛋白(SUMO)融合并转入大肠杆菌Rosetta中进行高效表达,目的是获得大量可溶的FGF23蛋白。方法:采用PCR扩增的方法,获得编码SUMO-FGF23core的DNA片段。将该片断插入表达载体pET22b中,构建了重组表达菌株pET22b-SUMO-FGF23core并转化入大肠杆菌Rosetta中。利用IPTG进行诱导表达。通过Ni-NTA亲和层析的方法分离纯化融合蛋白pET22b-SUMO-FGF23core。采用SUMO酶酶切融合蛋白后,并对纯化后的蛋白进行Western blotting分析。结果:所构建的表达菌株,在37℃条件下,其中ROSETTA/pET22b-SUMO-FGF23融合蛋白表达量可达50%,但是可溶性很低;30℃时可溶性也低一些;但在25℃诱导24h,其表达量约为菌体总蛋白的40%; pET22b-FGF23融合蛋白获得大量表达,总结所有的结果得到融合蛋白的最佳表达条件为当OD600=0.8时(约诱前3h),加入0.5mMIPTG,25℃诱导24h,经Ni-NTA柱亲和纯化,获得了纯度达90%以上的FGF23。讨论:通过融合表达,解决了FGF23独立表达时表达量低和可溶性差的问题,使其商业化的步伐进一步加快。但受实验条件和时间的限制,本研究仅对pET22b-SUMO-FGF23的表达和纯化进行了初步的研究,发酵条件的优化有待进一步的探讨研究。
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近年来由于抗生素的大量使用,导致临床耐药株日益增多,故寻找新种类抗菌药成为当前的研究热点。抗菌肽热稳定、水溶性好、免疫原性较低、作用迅速等特点,不仅可以有效杀灭细菌、真菌、病毒和寄生虫,部分还有一定抗恶性肿瘤作用,并且不易产生耐药性,对真核细胞毒性作用低等特点。随着分子生物学和生物技术的飞速发展,转基因植物的研究取得了一系列突破性成就,愈来愈受到世人瞩目。用植物生物反应器生产重组疫苗、重组抗体和其
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本文对辽宁省黏菌的物种多样性、区系多样性、生态多样性进行了系统的研究。物种多样性研究,共获得475份标本,整理鉴定出90种黏菌,它们隶属于24个属8个科5个目,接近中国黏菌总数(412种)的五分之一。在鉴定出的90种黏菌中,辽宁省新纪录属有5个,辽宁省的新记录种有34个。系统的编排了辽宁省黏菌的物种多样性编目。并对34个新记录种进行了形态学描述。凭证标本存放在吉林农业大学菌物标本馆。通过对辽宁省黏
家蝇抗菌肽是一类具有抗菌活性的黏性小分子多肽,其具有的特殊性质使其成为各种生物体先天免疫防御系统的重要组分。家蝇在病菌杂生的环境中,能够表现出超强的适应生存能力,这是因为其自身具有较为完善的先天免疫系统,并形成了特殊抵御外来有害微生物侵入的防御机制,因此,家蝇抗菌肽的研究已成为当前的热点和新方向,随着家蝇抗菌肽基因结构和功能研究的深入,人们认识到这些基因结构和功能应是基因差异表达的结果,为进一步揭
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