运动训练对大鼠运动区域皮质梗死灶周Nogo-A的表达、血清TNF-α水平的影响

来源 :四川医科大学 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:HongJuZhang
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目的:脑梗死(Cerebral infarction)严重危害人类健康,具有发病率高、病死率高、致残率高和复发率高的特点,占脑卒中70%以上。脑梗死的治疗可以分为手术治疗和非手术治疗,其中运动训练是临床上常用的改善肢体功能的一种非手术疗法。近年来许多研究表明,运动训练对于大脑缺血性损伤疗效确切,并得到国内外学者的认同。为深入探讨运动训练在脑梗死恢复中的作用机制,本实验应用改良的线栓法建立脑梗死大鼠模型,予以运动训练治疗,并对各组大鼠进行行为学改良神经功能缺失评分(modified neurological severity scores,mNSS),通过肉眼和HE染色观察大鼠运动区域皮质的形态变化和病理学改变,免疫组化法(IHC)比较大鼠运动区域皮质梗死灶周髓鞘相关蛋白-A(nerve myelin-associated inhibitory factor protein-A,Nogo-A)表达的变化,以及酶联免疫吸附试验(ELISA)方法比较血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的变化。拟初步探讨运动训练治疗脑梗死大鼠的作用机制。方法:1、大鼠的选择及干预方法:选取健康SD雄性大鼠84只(250g-300g),采用随机数字表法随机抽取28只作为正常组,余56只随机平均分为模型组和运动训练组。除正常组外均采用改良Longa的方法制作大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlasion,MCAO)模型,造模后按照Longa评分方法进行行为学评分,1-3分的大鼠为成功模型,可进行试验。运动训练组予以运动训练治疗。2、指标观察:①各组均在第1d、7d、14d、28d进行mnss评分,然后每组取7只予以采取血清和脑组织标本;②采用elisa法检测血清中tnf-α的表达,he染色观察大鼠脑组织病理学变化,采用免疫组化检测脑组织运动区域皮质梗死灶周nogo-a的表达;3、统计学处理:统计学分析采用ibmspssstatistics19.0软件进行,所得均为计量数值采用x±s表示,用单因素方差分析进行比较,p<0.05为具有统计学意义。结果:1、mnss评分:运动训练组与模型组大鼠的mnss评分在造模1d后均逐渐下降。术后1d时,两组的评分差异无显著意义(p>0.05);术后7d、14d、28d3个时间点,运动训练组较对照组大鼠神经功能改善明显(p<0.05)。2、he染色:正常组运动区域皮质内神经元排列整齐,细胞形态完整;模型组大鼠运动区域皮质梗死灶周神经元数量减少,排列紊乱,较多细胞被破坏,细胞核固缩,胞质染色深;运动训练组与模型组比较,前者神经元存活数量较多,大部分神经元形态和结构正常。3、nogo-a的表达:通过免疫组化检测,运动训练组和模型组相比,运动训练组术后7d、14d和28dnogo-a的表达较少,差异具有显著意义(p<0.05)。4、tnf-α的表达:与正常组比较,模型组和运动训练组术后1d血清中tnf-α水平升高,具有显著差异(p<0.01);术后7d,模型组和运动组tnf-α水平继续升高,但运动组较模型组升高较慢,两组比较差异具有统计学意义(p<0.05);术后14d,模型组和运动训练组含量均下降,运动训练组下降得稍多,两组比较差异无统计学意义(p>0.05);术后28d,模型组和运动训练组含量均接近正常。结论:1、采用改良longa大脑中动脉线拴法制备实验模型,能较好的模拟脑梗死的发病过程,成功制作MCAO动物模型。2、运动训练能有效改善大鼠运动区域梗死灶周病理学表现,运动训练可以下调运动区域皮质梗死灶周Nogo-A的表达及血清TNF-α水平,降低脑梗死大鼠mNSS评分。3、运动训练可有效改善脑梗死大鼠的神经功能缺失症状,其机制可能与下调运动区域皮质梗死灶周Nogo-A的表达及血清TNF-α水平有关。
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