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目的: 构建P53kd RNA慢病毒靶向沉默P53基因，研究SPAG6基因在调控人骨髓增生异常综合征（MDS）细胞TRAIL信号通路上的变化及其与P53基因的联系，明确SPAG6在MDS凋亡中的作用机制。 方法: 1.验证SPAG6基因的沉默效果及探索沉默SPAG6后对抗凋亡蛋白的影响：用SPAG6kdRNA慢病毒载体感染人MDS细胞株SKM-1细胞，转染率检测方法选用流式细胞术，感染细胞荧光的表达观察选用倒置荧光显微镜，SPAG6基因的沉默效果检测选用QRT-PCR和Western blot。最后，Western blot检测TRAIL通路中相关抗凋亡蛋白的表达情况。 2.SKM-1细胞双基因沉默模型的构建及验证：通过P53kd RNA慢病毒转染人结肠癌细胞株HCT116细胞筛选P53基因沉默的最佳靶点，利用筛选出来的最佳靶点序列转染SKM-1细胞；加入嘌呤霉素提高转染效率，P53基因的沉默效果用QRT-PCR和Western blot检验，构建SKM-1 P53kd细胞模型。用SPAG6kd RNA慢病毒转染SKM-1和SKM-1 P53kd细胞，QRT-PCR和Western blot验证。 3.探索SKM-1细胞和SKM-1 P53kd细胞模型中TRAIL诱导后的细胞凋亡分子表达：用CCK-8法检测重组人可溶性TRAIL蛋白（rTRAIL）对SKM-1细胞和SKM-1 P53kd细胞的适宜作用浓度，Western blot检测rTRAIL处理后SKM-1和SKM-1 P53kd细胞中Caspase-8、cleaved-PARP、PARP的表达水平。 结果: 1.SPAG6kd RNA慢病毒感染人SKM-1细胞成功，SPAG6基因表达被沉默，抗凋亡蛋白Bcl-2、XIAP、FLIP的表达水平升高。 2.SKM-1细胞双基因沉默模型成功构建，先成功构建了SKM-1 P53kd细胞模型，转染率在90%以上，P53基因在mRNA和蛋白表达水平较对照组均显著降低（P＜0.01）。SPAG6kd RNA慢病毒成功感染SKM-1细胞和SKM-1 P53kd细胞，转染率均在80%以上，SPAG6基因表达水平较对照组显著降低（P＜0.01）。 3.SPAG6以非P53依赖方式调控TRAIL诱导的MDS细胞凋亡。随着rTRAIL浓度的增加，细胞生长逐渐被抑制，30ng/mL rTRAIL诱导的细胞凋亡与对照组差异没有统计学意义，100ng/mL和300ng/mL rTRAIL显著诱导SPAG6kd细胞凋亡(P＜0.05)，而P53基因沉默与否并没有影响该结果。rTRAIL处理后细胞凋亡标志分子明显激活或水平升高，细胞中Caspase-8、cleaved-PARP、PARP的表达水平在SKM-1和SKM-1p53kd细胞中差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论: SPAG6基因以非P53依赖方式促进TRAIL诱导的MDS细胞凋亡。