高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗免疫特性的研究

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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)引起,该病于1987年首发于美国,现已遍布全世界,给各国养猪业带来难以估算的损失。2006年,我国南方地区暴发了一种以持续高热、食欲废绝、身体发绀、腹泻为特征,高发病率和高死亡率,传播迅速的高致病性猪繁殖与呼吸综合征(Highly pathogenic PRRS, HP-PRRS),经济损失巨大,研究证明引发该病的主要病原是高致病性PRRSV。为了积极预防和有效控制HP-PRRS的发生和蔓延,PRRS疫苗的研究受到广泛重视,目前用于预防PRRS的疫苗主要是灭活苗和减毒活疫苗,本研究对高致病性PRRS弱毒苗和灭活苗的免疫特性进行研究,为进一步研究高致病性PRRS疫苗的免疫机理和明确高致病性PRRS弱毒苗和灭活疫苗各自的免疫特性奠定基础,也为更好的预防和控制HP-PRRS提供实验依据。本实验对高致病性PRRS(HuN4)弱毒苗和高致病性PRRS(JXA1)灭活苗的免疫特性进行研究,将25头PRRSV抗原与抗体均阴性的4~5周龄的健康断奶仔猪,随机分为3组。第一组为对照组,共5头,第二组为HuN4弱毒苗组,共10头,第三组为JXA1灭活苗组,共10头。免疫后21d,3个组全部用高致病性PRRS(HuN4)强毒攻毒,分别于攻毒前后不同的时间点进行采血和剖杀,每日观察临床症状,测量直肠温度,ELISA试剂盒检测血清中PRRSV特异的抗体水平及TNF-α、IFN-α、IL-1、IL-6和CRP细胞因子水平,荧光定量RT-PCR方法检测抗原在各组织中的动态分布以及病毒血症的发生和持续情况,并取主要器官进行病理组织学观察。结果表明:HuN4弱毒苗组免疫后14d便可检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后21d病毒血症完全消失,免疫后各器官没有明显病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化轻微,JXA1灭活苗组免疫期间没有检测到PRRSV特异性抗体,攻毒后病毒血症持续存在,免疫后各器官有轻微病理变化,攻毒后临床症状和各组织器官病理变化较HuN4弱毒苗组严重,但比对照组明显减轻;HuN4弱毒苗免疫仔猪攻毒后,能明显抑制病毒在各组织中的复制,JXA1灭活苗免疫仔猪攻毒后病毒在体内的复制情况与对照组相似,较对照组轻,对病毒的复制也具有一定的抑制作用;HuN4弱毒苗组和JXA1灭活苗组免疫期间各细胞因子水平均降低,表明两种疫苗的免疫并不能刺激机体产生有效的的先天免疫应答反应,攻毒后各细胞因子水平明显升高,表明两种疫苗的免疫主要激发机体的特异性免疫应答,并且HuN4弱毒苗的免疫使机体产生了更为有效的体液免疫应答。本试验表明: HuN4弱毒苗能够快速有效的激发机体的体液免疫反应,在抵御高致病性PRRS(HuN4)强毒攻毒时,临床症状明显轻于JXA1灭活苗。
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