基于液相色谱-质谱联用技术的早期大肠癌血清代谢组学研究

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目的:通过液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)分别对早期大肠癌患者、进展期大肠癌患者和健康人的血清样本进行代谢产物检测,区分它们之间的代谢产物差异,为寻找早期大肠癌诊断的重要潜在生物标记物提供科学依据。方法:应用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)分别对16名早期大肠癌患者、22名进展期大肠癌患者以及20名健康人的血液样本进行检测,获得其代谢图谱及数据。比较三组样本的总离子流图和主成分分析结果,观察三组样本间是否存在差异。之后通过方差分析、偏最小二乘判别分析、支持向量机判别分析、ROC曲线、聚类分析等方法,筛选出区分能力强的差异性代谢产物。再将得到的代谢产物的质核比导入人类代谢组数据库(HMDB)对其进行结构鉴定,解释其生物学意义。结果:1、早期大肠癌患者、进展期大肠癌患者与健康人的血液代谢图谱分析中发现12种差异性代谢产物,这些代谢产物对三组间有很好的区分能力。2、大肠癌患者与健康人的血液代谢图谱分析中发现6种有显著差异的代谢产物褪黑素B、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酸、溶血磷脂酰乙醇胺、硫酸雄甾酮以及精氨酸,其中褪黑素B、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酸以及溶血磷脂酰乙醇胺的表达呈上升趋势,在大肠癌组中表达量增加;而硫酸雄甾酮、精氨酸呈下降趋势,在大肠癌组中表达量减少,提示这6种代谢产物可能为判断大肠癌的潜在的生物标志物。3、早期大肠癌患者与健康人的血液代谢图谱分析中发现3种有显著差异的代谢产物褪黑素B、溶血磷脂酰胆碱以及溶血磷脂酸,其中褪黑素B、溶血磷脂酸的表达量呈上升趋势,溶血磷脂酰胆碱呈先上升后下降的趋势,提示这3种代谢产物可能为判断早期大肠癌的潜在的生物标志物。结论:1、早期大肠癌患者、进展期大肠癌患者与健康人的血清中存在差异性代谢产物;2、褪黑素B、溶血磷脂酰胆碱、溶血磷脂酸、溶血磷脂酰乙醇胺、硫酸雄甾酮以及精氨酸这6种代谢产物在大肠癌组与健康人组存在显著差异。3、褪黑素B、溶血磷脂酰胆碱以及溶血磷脂酸这3种代谢产物在早期大肠癌组与健康人组存在显著差异,可能为判断早期大肠癌潜在的生物标志物。
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