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背景骨关节炎(osteoarthritis,OA)是在骨科领域,仍然是非常棘手的疾病,其致畸致残率仍较高。骨性关节炎的独特性病理学变化是软骨的进行性退变和关节周围的骨赘的不断形成。虽然多种治疗方案已被用于OA患者的治疗,但除了关节置换术外尚没有其他有效的治疗方案。因此许多的研究者对旨在修复关节软骨的组织工程技术开展了深入的研究。但是合适的种子细胞来源仍是制约组织工程在软骨方面应用的主要问题,多项实验研究也均存在一定的局限性。骨骼肌中的肌源性细胞(muscle derived cells,MDCs)在含有骨形态生成蛋白-4(Bone Morphogenetic Protein-4)及转化生长因子-β3(Transforming Growth Factor-β3)的培养基中可以表现出向软骨分化的的特性。在骨骼肌中含有多种祖细胞和卫星细胞,其负责肌肉再生功能。骨骼肌的来源丰富,几乎遍布身体的各个组织,并且这类细胞可以在微创的情况下获得,是非常理想的种子细胞来源。但是骨骼肌的解剖结构层次复杂,如骨骼肌内的肌纤维丰富,肌纤维的外层结构由肌外膜构成,而肌外膜之间又有血管和神经的走形,肌纤维构成许多的肌束,外包裹肌束膜,因此骨骼肌中的软骨种子细胞的来源可能性较多,仍需进一步实验来探索。目的分离大鼠骨骼肌中筋膜组织,利用组织染色,免疫荧光,组织培养,细胞培养的技术来鉴定骨骼肌中筋膜组织和成肌组织向软骨分化的能力,进而确定骨骼肌中向软骨分化的具体组织成分。方法解剖分离健康雄性大鼠的臀大肌筋膜,将样本剪碎后在BMP4和TGF-β3的作用下培养14天,阿尔新蓝(Alcian blue)和番红O(Safranin O)染色检验其向软骨细胞分化的潜力;分离样本细胞,使用细胞表面标记物结蛋白(肌肉源性标记物),CD34(造血干细胞源性标记物),波形蛋白(成纤维细胞表面标记物),v WF(血管源性标记物)和α-SMA(平滑肌源性标记物)的相应抗体的行免疫组化染色来检测FDCs细胞标志物的表达情况;L6成肌细胞与FDCs混合,在DMEM(Delbeeco Modified Eagle Medium)培养14天,比较二者向软骨形成分化的能力。结果当筋膜组织块在培养14天后,Alcian blue和Safranin O染色后可以见到细胞外存在大量的酸性粘多糖物质,可见样本细胞有向软骨细胞分化的能力;筋膜组织块经过分离纯化后的细胞,经过细胞免疫荧光处理,分析其表面标志物的结果显示:分离的FDCs的不表达结蛋白(肌原性标记),CD34、vWF(内皮标记)和α-SMA(周细胞标记),但大多数的细胞都表达波形蛋白(成纤维细胞标记);FDCs与大鼠成肌细胞的混合培养结果显示:纯FDCs组经培养后形成的软骨细胞形态和软骨细胞内基质的形成量最好,表明成软骨分化能力最强,但是L6成肌细胞含量增高时,其余各组的软骨细胞形态和软骨细胞内基质的形成量逐渐下降,表明其成软骨分化能力逐渐下降。结论从FDCs的HE染色、组织培养、细胞表面标记物分析、细胞培养、免疫染色结果显示了FDCs向软骨细胞分化的能力;FDCs与L6大鼠成肌细胞的不同情况混合培养对比之后,可见各组之间成软骨分化的具有明显的差异,FDCs是骨骼肌来源的细胞中具有成软骨能力的种子细胞,而成肌细胞不具有成软骨能力。