新疆石榴皮提取物对原代培养胰岛细胞功能的影响

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目的研究新疆石榴皮提取物对大鼠胰岛细胞生长和胰岛素释放的影响。方法将石榴皮用95%乙醇对石榴皮进行提取得到石榴皮的乙醇提取物。另将石榴皮依次用极性从小到大的6种溶剂进行提取得到6种提取物;共得到7种提取物,进行以下实验:将优降糖阳性对照组、正常对照组及7种石榴皮提取物不同浓度组与胰岛细胞共同孵育一定时期,分别在不同时间,采用MTT法测定细胞生长活力(OD值)。从7种石榴皮提取物中筛选出能促进胰岛细胞生长的提取物,并进行以下实验:(1)优降糖阳性对照组,正常对照组及不同浓度石榴皮提取物组与胰岛细胞共同孵育在高糖(25.2mmol/L) DMEM培养基中,分别在不同时间取上清液,用放射免疫法检测培养液中的胰岛素水平,以评价胰岛细胞功能变化。(2)正常对照组,高糖组(33.3mmol/L),阳性对照组,高糖+石榴皮提取物组(100μg/ml),37℃,5%CO2培养72h,进行葡萄糖负荷实验,放射免疫法检测培养液中胰岛素水平。以评价石榴皮提取物在高糖环境下对胰岛细胞是否有保护作用。(3)正常对照组,阳性对照组,棕榈酸组(0.25mmol/L),棕榈酸+石榴皮提取物组(100μg/ml),油酸组(0.25mmol/L),油酸+石榴皮提取物组(100μg/ml),37℃,5%CO2培养36h,进行葡萄糖负荷实验,放射免疫法检测培养液中胰岛素水平,以评价石榴皮提取物在高脂环境下对胰岛细胞是否有保护作用。结果(1)石榴皮乙酸乙酯提取物对胰岛细胞生长活力有显著影响,能促进胰岛细胞生长,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)石榴皮乙酸乙酯提取物能促进胰岛细胞分泌胰岛素,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)高糖+石榴皮乙酸乙酯提取物组(100μg/ml),棕榈酸+石榴皮乙酸乙酯提取物组(100μg/ml)和油酸+石榴皮乙酸乙酯提取物组(100μg/ml)胰岛素分泌量分别高于高糖组,棕榈酸组和油酸组,但均低于正常对照组(P<0.01)。结论石榴皮乙酸乙酯提取物在体外能显著促进胰岛细胞生长和胰岛素分泌,并对胰岛细胞功能具有一定的保护作用。
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