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苹果锈果病是苹果果实的主要病害之一,严重影响果品的商品价值和经济价值,其病原物为苹果锈果类病毒(Apple scar skin viroid,ASSVd),由于其分子量小,依靠寄主细胞的酶系统进行复制,复制所需时间短,比其寄主有更快的进化速度。对苹果锈果类病毒进行分子变异研究可为病毒分类、诊断、流行规律的认识以及防治提供理论依据。本研究对烟台地区牟平、蓬莱、栖霞、招远以及文登地区的嘎啦、红将军、富士样品中的ASSVd进行分离和序列分析,比较同一地区不同品种和同一品种不同地区的ASSVd分子变异情况。研究结果如下:1、本研究在不同地区不同的苹果品种上共分离获得56条ASSVd变体。(1)46条变体与NCBI中印度分离物FM208142.1相似性最高,为78.5%~100%。其中30条331bp的变体与FM208142.1相比,仅个别位点存在差异或完全相同;5条330bp变体中,4条变体与FM208142.1个别位点存在差异,而变体FM330-2与FM208142.1有8个位点存在差异,变异位点位于C区和T1区;2条332bp变体与FM208142.1分别有4个、8个位点不同,变异位点在C区和T1区。系统进化树显示330bp、331bp、332bp的37条变体均与FM208142.1亲缘关系较近,二级结构预测均为棍棒状。9条变体核苷酸序列长度发生较大变异,其中包括4条272bp变体、3条371bp变体、1条372bp变体、1条342bp变体。系统进化树显示,除342bp变体外,其它8条变体均与FM208142.1亲缘关系较近。二级结构预测结果表明:9条变体二级结构均出现分支,与大多数马铃薯纺锤块茎类病毒的棍棒状结构不符。(2)其余10条变体中,基因长度为263bp的变体1条,与印度昆诺阿藜HG764206分离物相似性最高,为77.20%;333bp的变体2条,与新疆KC110858.1相似性最高,为95.2%;365bp的变体2条,与希腊野樱桃分离物FJ974062.1相似性最高,为88.21%;354~359bp变体5条,均与希腊金帅分离物GQ249347.1相似性最高,分别为89.08%-91.64%。系统进化结果显示,这10条变体与FM208142.1亲缘关系较近。二级结构预测结果表明,除2条333bp的变体外,8条变体出现分支结构,其中长度为365bp的变体出现多分支结构。2、将本研究获得的330~333bp的变体序列与NC001340序列进行多序列比对,共发现19个信息位点,突变位点和信息位点主要分布在二级结构P区、C区和T1区。3、同一地区不同品种(嘎啦、红将军、富士)上的ASSVd存在一定的寄主专化性。不同地区嘎啦和将军中的ASSVd存在一定的地区专化性,而富士品种中的ASSVd序列不具有明显地区专化性。