含钙中药药性规律及在白虎汤中抗高热惊厥药效的作用研究

来源 :安徽中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:guoerxong
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目的:系统分析含钙中药药性规律;研究白虎汤(Bai-Hu-Tang,BHT)对高热惊厥(Febrile seizures,FS)模型大鼠的作用;探讨不同含钙中药在BHT中对FS模型大鼠的影响。方法:第一章基于数据挖掘探讨含钙中药药性规律查阅《中国药典》、《中华本草》、《中药大辞典》和《安徽省中药饮片炮制规范》统计主要含钙的中药29味,检索文献确定Ca2+含量和阴离子含量,制成含钙中药原始数据库。运用Clementine 12.0软件进行关联分析,SPSS 23.0软件进行聚类分析和主成分分析,探讨含钙中药的一般药性规律和主要成分。第二章白虎汤对高热惊厥模型大鼠的作用采用恒温45℃热水浴诱导幼年SD大鼠FS模型,实验大鼠分为7组,空白组,模型组,硫酸镁(Mg SO4)组、布洛芬组和BHT高、中、低剂量组,每组10只,共70只。称量大鼠实验前后体重;记录大鼠惊厥潜伏期和惊厥持续时间;HE染色观察大鼠海马区损伤;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测脑组织Glu、Asp、TNF-α及IL-1β含量和血清TNF-α及IL-1β含量;比色法检测血清和脑组织Ca2+含量;烘干法测量大鼠脑组织含水率,同时运用实验动物体组成测定分析仪检测大鼠总含水率(Total Body Water,TBW),细胞外含水率(Extracellular Fluid,ECF),细胞内含水率(Intracellular Fluid,ICF),脂肪量(Fat Mass,FM),除脂肪量(Free Fat Mass,FFM)和身体质量指数(Body Mass Index,BMI)等生物电阻抗指标。第三章不同含钙中药在白虎汤中对高热惊厥模型大鼠的作用采用恒温45℃热水浴诱导幼年SD大鼠FS模型,实验大鼠分为空白组,模型组,Mg SO4组、布洛芬组,BHT组,BHT除石膏组,石膏组,BHT除石膏加Ca SO4·2H2O组,BHT除石膏加石决明组,BHT除石膏加鳖甲组,每组10只,共100只。称量大鼠实验前后体重;记录大鼠惊厥潜伏期和惊厥持续时间;HE染色观察大鼠海马区损伤;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测脑组织Glu、Asp、TNF-α及IL-1β含量和血清TNF-α及IL-1β含量;比色法检测血清和脑组织Ca2+含量;同时运用实验动物体组成测定分析仪检测总含水率(Total Body Water,TBW),细胞外含水率(Extracellular Fluid,ECF),细胞内含水率(Intracellular Fluid,ICF),脂肪量(Fat Mass,FM),除脂肪量(Free Fat Mass,FFM)和身体质量指数(Body Mass Index,BMI)等生物电阻抗指标;Western blot检测不同含钙中药在BHT中对FS模型大鼠脑组织中钙调蛋白(Calmodulin,CaM)和水通道蛋白4(Aquaporin4,AQP4)的表达。结果:第一章基于数据挖掘探讨含钙中药药性规律关联分析结果显示含钙中药多性寒,味咸,归肝经,主要功效平肝潜阳和安神镇惊;聚类分析结果表明含钙中药主要分为碳酸钙组、磷酸钙组和硫酸钙组,三者占含钙中药96.5%;由主成分分析结果推测含钙中药的主要成分为Ca2+、CO32-和PO43-离子。第二章白虎汤对高热惊厥模型大鼠的作用与模型组相比,Mg SO4组、布洛芬组、BHT高剂量组和BHT中剂量组大鼠体重显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,布洛芬组、Mg SO4组、BHT高剂量组和中剂量组大鼠惊厥潜伏期延长,惊厥持续时间逐渐缩短(P<0.01)。模型组大鼠海马各区神经元形态发生显著的病理改变,布洛芬组、Mg SO4组、BHT高剂量组和BHT中剂量组能显著改善模型大鼠海马区神经元损伤。布洛芬组、Mg SO4组、BHT高剂量组和BHT中剂量组大鼠脑组织Ca2+,Glu、Asp、TNF-α及IL-1β含量较模型组显著降低(P<0.01,P<0.05);与模型组相比,BHT高剂量组和BHT中剂量组大鼠血清Ca2+含量显著升高(P<0.05);Glu、Asp、TNF-α及IL-1β含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,布洛芬组、Mg SO4组、BHT高剂量组和BHT中剂量组大鼠脑组织含水率、TBW、ECF和FFM显著降低(P<0.01,P<0.05),ICF、FM和BMI显著升高(P<0.01,P<0.05)。第三章不同含钙中药在白虎汤中对高热惊厥模型大鼠的作用与模型组相比,Mg SO4组、布洛芬组、BHT组、石膏组和BHT除石膏加Ca SO4·2H2O组大鼠体重显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,布洛芬组、Mg SO4组、BHT组和石膏组大鼠惊厥潜伏期延长,惊厥持续时间逐渐缩短(P<0.01,P<0.05)。模型组大鼠海马各区神经元形态发生显著的病理改变,布洛芬组、Mg SO4组、BHT组、石膏组和BHT除石膏加石决明组能显著改善模型大鼠海马区神经元损伤。与模型组相比,布洛芬组、Mg SO4组、BHT组大鼠脑组织Ca2+,Glu、Asp、TNF-α及IL-1β含量均有不同程度降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,布洛芬组、BHT组、石膏组和BHT除石膏加石决明组大鼠血清Ca2+显著升高(P<0.01,P<0.05);血清TNF-α及IL-1β含量均有不同程度降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,布洛芬组、Mg SO4组和BHT组大鼠脑组织含水率、TBW、ICF和FFM显著降低(P<0.01,P<0.05),ECF、FM和BMI显著升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,Mg SO4组、布洛芬组,BHT组,BHT除石膏组,BHT除石膏加Ca SO4·2H2O组,BHT除石膏加石决明组,BHT除石膏加鳖甲组CaM显著降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,Mg SO4组、布洛芬组,BHT组,BHT除石膏组,石膏组,BHT除石膏加Ca SO4·2H2O组,BHT除石膏加石决明组,BHT除石膏加鳖甲组AQP4显著降低(P<0.01)。结论:1.含钙中药多性寒、味咸、归肝经,主要功效为平肝潜阳和安神镇惊;主要分为碳酸钙、磷酸钙和硫酸钙三类;主要成分是Ca2+、CO32-和PO43-离子;对小儿FS和高血压有潜在的治疗效果。2.BHT中剂量组通过降低FS模型大鼠血清和脑组织炎症因子,升高血清Ca2+含量,降低脑组织细胞内Ca2+含量从而缓解模型大鼠惊厥症状和脑水肿现象,并预防FS的重复发作。3.BHT通过降低FS模型大鼠血清和脑组织炎症因子,升高血清Ca2+含量,降低脑组织细胞内Ca2+含量并降低CaM和AQP4表达,从而缓解模型大鼠惊厥症状和脑水肿现象,并预防FS的重复发作。不同的含钙中药不能互相替代入药,其具体作用机制有待进一步研究探索。
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