脑心通对实验性脑缺血大鼠神经功能重建机理研究

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目的:观察缺血再灌注损伤后SD大鼠不同时间点神经功能评分以及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的阳性细胞和神经巢蛋白(Nestin)的表达,探讨脑缺血后内源性神经干细胞增殖情况及脑心通对神经功能重建的作用。方法:选用健康雄性SD大鼠136只,鼠龄7-8周,体重250-300g,以线栓法制作大脑中动脉缺血(MCAO)模型,随机分成四组:假手术组;MCAO模型组;MCAO+脑心通胶囊低剂量组;MCAO+脑心通胶囊高剂量组。每组再按照脑缺血再灌注后第3天、第7天、第14天和第21天四个不同时间点进行神经功能评分及脑梗死体积测定;免疫组化法测定不同时间点BrdU标记的阳性细胞和Nestin平均荧光强度值,观察内源性神经干细胞的增殖以及脑心通对它们的影响。结果:(1)除假手术组外,其余三组实验鼠在缺血再灌注后均出现不同程度神经功能缺损,各组神经功能评分随时间延长而降低,各时间点神经功能评分具有差异(P<0.01);不同剂量脑心通组与MCAO模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);而脑心通高、低剂量组之间比较无明显差异(P>0.05)。TTC染色发现缺血再灌注后第7天各组大鼠脑梗死体积最大;不同时间点之间比较差异有统计学意义(P<0.05);脑心通高剂量组、脑心通低剂量组与模型组之间梗死体积互相比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。(2)模型组、脑心通低剂量组和脑心通高剂量组海马齿状回颗粒下层(SGZ)及室管膜下区(SVZ)在缺血再灌注第3天已出现BrdU阳性细胞和Nestin表达,第7天时其平均荧光强度值最高,后逐渐降低,各组内不同时间点BrdU阳性细胞和Nestin平均荧光强度值差异有统计学意义(P<0.01);而组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1、脑心通胶囊对改善缺血再灌注损伤后实验鼠神经功能评分和减轻梗死体积有一定的促进作用,但对神经功能评分的影响与药物剂量不相关。2、缺血再灌注损伤后,实验鼠海马齿状回及室管膜区域可见内源性神经干细胞反应性增殖,BrdU阳性细胞及Nestin的平均荧光强度值以第7天时最高,后逐渐降低。3、未发现脑心通胶囊对SVZ、SGZ区域内源性神经干细胞增殖有促进作用。
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