正本清茶是基于药食两用中药组方,由成都中医大养生保健科技有限公司生产的茶产品,其配方“清热解毒药物组合物及其制备方法和用途”获得国家发明专利。为将其开发成具有中医药特色的保健食品,本课题首次对正本清茶进行功能性试验,建立科学的生产工艺和质量控制方法;并采用高分辨质谱技术对潜在的功效物质进行定性鉴定分析,为进一步探索其作用机理、药效物质及申报保健食品奠定基础(本课题来源于四川省科技创新苗子工程和四川省成都市科技局惠民项目)。其具体内容如下:一、正本清茶质量控制方法研究及标准草拟(1)建立HPL波长切换法同时测定正本清茶中没食子酸、绿原酸、栀子苷的含量。试验结果显示,所建立的含量测定方法能将三种物质与非待测成分很好分离,方法学考察符合要求,方法稳定可靠,操作简便。(2)优选正本清茶加工生产过程中的参数。以水浸出物、没食子酸、绿原酸和栀子苷含量为指标对正本清茶生产过程中的干燥时间、干燥温度和粉碎粒径三个主要因素进行单因素考察,在此基础上设计Box-Behnken响应面试验,以四个指标的总评归一值为评判依据,对相应参数进行优选,确定了最佳生产工艺条件。(3)建立正本清茶质量控制的指纹图谱分析方法。采用高效液相-紫外检测器对样品进行分析,在105 min内19个共有峰得到良好分离,其中4个成分采用对照品进行了指认,部分色谱峰得到了归属。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对10批正本清茶样品进行相似度分析,10批正本清茶相似度均在0.95以上,表明正本清茶的产品质量一致性好,稳定性高,该方法可有效地用于正本清茶的质量控制。(4)建立正本清茶显微鉴别和薄层鉴别方法;测定正本清茶水分、灰分、重金属、微生物等,起草正本清茶质量控制的企业标准,为今后正本清茶的质量控制提供相关依据。二、正本清茶通便及降脂药效学研究通过建立复方地芬诺酯所致小鼠便秘模型,观察正本清茶对小鼠排便情况和小肠蠕动情况的影响,实验结果表明正本清茶具有显著的通便药效作用。通过建立大鼠高血脂症模型,测定分析大鼠血清中TG、T、HDL-、LDL-4个血脂指标,探讨正本清茶的降血脂药效作用,实验结果表明正本清茶无明显的降血脂的药效作用。三、正本清茶高效液相-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱成分分析采用高效液相-四级杆/静电场轨道阱液质联用技术定性分析正本清茶水溶液中的化学成分。通过正负离子扫描的一级质谱图信息和二级质谱相结合,查阅相关文献并与对照品、数据库进行对照,最后鉴定出正本清茶水溶液中的39个化合物。其中,氨基酸类化合物4个,黄酮类化合物5个,三萜皂苷类化合物8个,有机酸类化合物13个,环烯醚萜苷类化合物6个,单萜类化合物2个,藏红花色素类化合物1个。该结果为进一步研究正本清茶功效学因子和药效作用奠定了物质基础;另一方面,运用高效液相-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术对中药复方药效物质进行分析研究,为建立更科学合理的中药复方质量控制方法提供参考。