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目的:
1.检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制因子-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)在子宫腺肌病患者异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜中的表达情况,分析这两种因子在三组间表达的差异;
2.探讨MMP-2、TIMP-2与子宫腺肌病发病机制的关系,为临床治疗提供新的思路及实验依据。
材料与方法:
1.研究对象
选取我院2006年2月至2007年9月因子宫腺肌病行全子宫切除术的患者42例,取其在位及异位内膜作为研究组(子宫腺肌病在位内膜组、子宫腺肌病异位内膜组),子宫内膜分期按苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色切片确定,其中增生期24例,分泌期18例。
选取同期因子宫肌瘤在我院行全子宫切除术的患者32例,取其内膜作为对照组(正常子宫内膜组),其中增生期18例,分泌期14例。所有标本均经病理诊断证实。全部患者术前6个月内均未使用激素类药物治疗,且无其他特殊病史;年龄、孕产史和宫腔内手术史无差异。
2.实验方法
应用逆转录-聚合酶链式反应技术(reverse transcription-polymerasechain reaction,RT-PCR)检测各组内膜组织中的MMP-2 mRNA与TIMP-2 mRNA的表达情况,凝胶成像及分析系统测定目的基因扩增产物的灰度值,以β-肌动蛋白(beta-actin,β-actin)为内参,各基因与β-actin的灰度值比值作为其相对表达量。 3.统计分析实验数据均以x±S表示。采用SPSS13.0统计软件进行分析,各组MMP-2及TIMP-2的相对表达量比较采用单因素方差分析或两独立样本的t检验,检验水准α=0.05。
结果:
1.MMP-2 mRNA在子宫腺肌病异位内膜组、子宫腺肌病在位内膜组、正常子宫内膜组中的表达有差异,异位内膜组表达最高,正常子宫内膜组表达最低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。
2.TIMP-2 mRNA在子宫腺肌病异位内膜组、子宫腺肌病在位内膜组、正常子宫内膜组中的表达有差异,异位内膜组表达最低,正常子宫内膜组表达最高,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。
3.MMP-2、TIMP-2在子宫腺肌病在位内膜组、正常子宫内膜组的表达呈周期性变化,分泌期均高于增生期,差异有统计学意义(P<0.05);而在子宫腺肌病异位内膜组中,MMP-2、TIMP-2的表达在分泌期与增生期相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
4.MMP-2/TIMP-2的比值在子宫腺肌病异位内膜组、子宫腺肌病在位内膜组、正常子宫内膜组中依次降低,各组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论:
1.子宫腺肌病异位内膜组织中MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA的表达及MMP-2/TIMP-2比值均异常,提示MMP-2、TIMP-2及MMP-2/TIMP-2的失衡可能与子宫腺肌病的发生、发展有密切关系。
2.子宫腺肌病在位内膜组织中MMP-2 mRNA及TIMP-2 mRNA的异常表达,表明在位内膜与正常子宫内膜可能存在分子及生物学特质上的差异,为“源头治疗”提供了实验依据。
3.子宫腺肌病在位内膜组织和正常子宫内膜组织中MMP-2 mRNA与TIMP-2mRNA的表达均呈周期性变化,提示两者在子宫内膜中的表达可能受到卵巢激素的调控;而异位内膜组织中的MMP-2 mRNA与TIMP-2 mRNA的表达失去周期性变化,这可能是临床上应用孕激素治疗子宫腺肌病效果欠佳的原因之一。