抑制NF-κB活性对PPARγ激动剂ciglitazone诱导肝癌细胞凋亡的影响

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过氧化物酶增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)是核受体中的超家族,其从转录水平参与许多细胞功能及病理生理的调控过程,包括脂肪细胞分化、糖、脂代谢、炎性反应、动脉粥样硬化、癌细胞的分化形成等。近年来,研究发现PPARγ与肿瘤具有相关性,可以抑制肿瘤细胞的生长、促进肿瘤细胞凋亡,提示PPARγ途径有可能是肿瘤治疗的新方向。  核转录因子-κB(Nuclear factor-kappaB,NF-κB)是肿瘤坏死因子(TNF)和化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡耐受的重要因子。某些抗癌药物在诱导肿瘤细胞凋亡的过程中,可同时活化NF-κB,后者通过抑制凋亡,调控细胞周期,使肿瘤细胞对化疗药物产生耐受,因此在抗肿瘤的过程中对于那些能使NF-κB活化者可采取抑制NF-κB活性的措施,以提高疗效。  本实验探讨抑制NF-κB活性对PPARγ激动剂ciglitazone诱导人源肝癌细胞株HepG2凋亡的影响。将NF-κB特异性的抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)50μmol/L加入人肝癌细胞HepG2中,凝胶迁移率实验(electrophoreretic mobility shift assay,EMSA)检测NF-κB活性的变化,进而以浓度为50mol/L的ciglitazone处理加了PDTC和未加PDTC的细胞7天,采用流式细胞仪进行细胞凋亡检测,Westernblot观察处理前后Bcl–2、Bax蛋白在凋亡过程中的表达变化,DEVD-pNA降解法检测caspase3的活性变化。结果表明:(1)EMSA显示NF-κB活性明显下降;(2)ciglitazone能抑制HepG2细胞增殖,机制与细胞凋亡有关;(3)抑制NF-κB活性可增强ciglitazone对HepG2细胞增殖的抑制作用,更多的细胞Bcl-2表达的减少及Bax表达增加,caspase3的活性增加。结论:抑制NF-κB的活性能增加肝癌细胞HepG2对PPARγ激动剂ciglitazone的敏感性,即抑制NF-κB的活性能协同ciglitazone抑制肝癌细胞HepG2的凋亡。
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