宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,对全世界尤其是欠发达国家的妇女健康构成严重威胁。烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)是由α(α1～α10)和β(β1～β4)亚基组合构建的配体门控离子通道,一般形成异源五聚体,也有一些亚基可以形成同源五聚体(α7、α9),不同的nAChRs亚型具有不同的生理特性。最初认为nAChRs只存在于神经系统中,现在nAChRs已被证实与多种癌症有关,是促进肿瘤进展的关键调节器。然而,nAChRs在宫颈癌中的表达情况尚不清楚。因此,本研究探讨了 nAChRs在人宫颈癌细胞系和人正常宫颈细胞系中的差异表达情况,进一步用针对nAChRs不同亚型的特异性阻断剂——α*-芋螺毒素来处理细胞,进而探究α*-芋螺毒素对宫颈癌细胞增殖的影响,以期为寻找宫颈癌治疗的新靶点提供新的线索。首先,本研究通过反转录PCR对人宫颈癌细胞系(SiHa、HeLa和CaSki)以及人正常宫颈细胞系(Ect1/E6E7)中nAChRs亚基的表达情况进行检测并测序。其次,通过荧光定量PCR和western blot分别从mRNA水平和蛋白水平对nAChRs的表达进行定量分析。最后,基于nAChRs差异表达的情况,采用MTT法揭示作用于nAChRs不同亚型的特异性阻断剂α*-芋螺毒素对宫颈癌细胞增殖的影响。结果表明,在检测的所有细胞系中(SiHa、HeLa、CaSki和Ect1/E6E7),α3～α7、α9、α10和β2～β4亚基均有表达。与正常细胞相比,SiHa细胞中α3、α9、α10、β2、β3和β4亚基高表达,HeLa细胞中无亚基高表达,CaSki细胞中α9和α10亚基高表达。用α9α10 nAChR的强阻断剂αO-芋螺毒素GeXIVA处理SiHa、CaSki和Ect1/E6E7细胞,结果显示,GeXIVA能抑制癌细胞SiHa和CaSki细胞的增殖,同样对正常细胞Ect1/E6E7的增殖有一定的杀伤作用,但对癌细胞增殖的抑制率显著高于对正常细胞的抑制率。用α3β4 nAChR的强阻断剂α-芋螺毒素TxID处理SiHa和Ect1/E6E7细胞,结果显示TxID能抑制癌细胞SiHa和正常细胞Ect1/E6E7的增殖,且TxID对SiHa细胞的增殖抑制效果强于对Ect1/E6E7细胞的增殖抑制效果。综上所述,nAChRs在人宫颈癌细胞系和人正常宫颈细胞系中存在差异表达,而特异性作用于α9α10 nAChR或α3β4 nAChR的α*-芋螺毒素能抑制宫颈癌细胞的增殖,为海洋药物α*-芋螺毒素靶向治疗宫颈癌提供了新的证据,并为进一步探究其靶向作用机制奠定了基础。