性腺发育不良及AIS儿童的临床表型和病因研究

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目的 研究染色体为46,XY的睾丸发育异常患者的临床表现和性激素变化以及血清AMH和INHB检测的临床意义。重点研究与性发育相关的基因 GATA4、SRY、SOX9、DAX1、DMRT1、CBX2 和 FGF9的变异对睾丸发育异常病人的影响以及基因型与表观型的关系。方法 通过采集病史和相关检查结果对患者临床表现进行评估。检测患者体内包括AMH和INHB在内的性激素水平。对全部患者的血液标本进行DNA提取,对相关基因进行引物设计与合成后行PCR扩增,最后测序和分析。结果染色体为46,XY的睾丸发育异常的患者中,睾丸缺如的患者最多占60%,睾丸呈条索状的患者占26.7%,隐睾患者占13.3。11名患者无法检测到血清AMH和INHB。研究中发现三种非SNP错义突变,分别是 GATA4 基因 c.648 G>C(p.E216D)突变、NR5A1 基因 c.1350 C>G(p.N450K)突变和 SOX9 基因 c.1166 C>T(p.P389L)突变。另外发现9名患者有NR5A1基因c.G437C(p.G146A)变异和7名患者有 DMRT1 基因 c.133 T>A(p.S45T)变异,均为 SNP。在 SRY、DAX1、CBX2和FGF9基因未发现任何错义突变。这提示GATA4基因c.648 G>C(p.E216D)突变、NR5A1 基因 c.1350 C>G(p.N450K)突变和 SOX9基因c.1166 C>T(p.P389L)突变可能与患者的表型关。结论(1)染色体为46,XY的睾丸发育异常患者临床多表现为睾丸缺如或睾丸呈条索状。(2)血液AMH和INHB水平与HCG激发试验前后睾酮水平联合评估,更有利于睾丸功能及睾丸组织存在与否的判断。(3)GATA4 基因的 c.648 G>C(p.E216D)位点突变、NR5A1 基因c.1350 C>G(p.N450K)位点突变和 SOX9 基因的 c.1166 C>T(p.P389L)位点突变可能是染色体为46,XY的睾丸发育异常患者致病因素之一。9名患者的NR5A1基因的变异c.G437C(p.G146A)和7名患者的DMRT1基因的变异c.133 T>A(p.S45T)不具备致病性。目的 探究13例雄激素不敏感综合征患者的临床表现与AR和SRD5A2基因变异的关系。方法 通过采集病史和相关检查结果对患者临床表现进行评估。对全部患者和病例对照组血液标本提取DNA,对相关基因进行引物设计与合成后进行PCR扩增,最后进行测序和分析。结果 本研究中发现13名患者共6种AR基因错义突变,分别是c.2107T>C(p.S703P)、c.528C>A(p.S176R)、c.170T>A(p.L57Q)、c.2567G>A(p.R856H)、c.2740C>G(p.P914A)和 c.2351A>G(p.Q784R),其中有3种新的突变分别是c.2107T>C(p.S703P)、c.2740C>G(p.P914A)和 c.2351A>G(p.Q784R),此外,还发现 3 名患者 AR 基因的CAG重复序列有变异。研究中的患者可有女性外阴、隐睾和尿道下裂等临床表现。13名患者中未发现具有致病性的SRD5A2基因变异。对照组未发现任何AR错义突变,仅发现有15例不具致病性的SRD5A2基因变异。结论(1)雄激素受体的6种错义突变c.2107T>C(p.S703P)、c.528C>A(p.S176R)、c.170T>A(p.L57Q)、c.2567G>A(p.R856H)、c.2740C>G(p.P914A)和 c.2351A>G(p.Q784R)均可能使患者致病。(2)3种新的突变 c.2107T>C(p.S703P)、c.2740C>G(p.P914A)和c.2351A>G(p.Q784R)可能导致完全性雄激素不敏感综合征。(3)AR基因的CAG重复序列变化可能是无AR突变患者的致病原因之一。
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