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[目 的]随着骨修复微创技术的发展,可注射微球支架在骨修复领域也取得了很大的进展。为了提高抗炎和成骨效果,将具有抗炎、抗氧化和促成骨作用的白藜芦醇(Res)、具备骨传导性和骨诱导性的纳米羟基磷灰石(n-HA)以及具备良好生物相容性、无毒、抗菌功能的壳聚糖(CS)复合制备n-HA/Res/CS复合型微球,并用香草醛作为交联剂对该复合型微球进行交联固化以达到稳定微球的目的。[方 法]我们采用油-水乳化交联法制备了不同含量的Res的纳米羟基磷灰石/白藜芦醇/壳聚糖复合微球(n-HA/Res/CS)。采用FT-IR、XRD、SEM、激光粒度分析、溶胀率分析、HPLC、荧光染色等检测手段对其理化性质进行了表征,采用Live/dead染色、CCK-8检测、RT-qPCR、免疫荧光染色分析、茜素红染色用于评估细胞活力、细胞增殖、抗炎以及成骨分化能力。[结 果]简要阐述了通过乳化交联法制备的载Res微球的主要步骤,包括乳化速度,相体积比,分散相的组成以及交联固化的方法。结果表明,Res在n-HA/CS基体中的含量为0.75～9.07%。Res在复合微球中的包封率为13.42～39.43%。复合微球粒径分布大小分布范围在30.75～110.87 μm并且具备合适的溶胀性,随着Res加入复合型微球中的量的增加,微球的平均直径也随之增加。通过体外降解表明香草醛交联的n-HA/CS/Res复合型微球可以降解并以可控的释放速率释放出Res,也证实了在骨组织工程中,该复合型微球在生理环境中药物释放的可行性,同时将间充质干细胞(MSCs)接种到复合型微球,表现出良好的细胞生物相容性。通过香草醛交联壳聚糖载Res微球,实现了 Res的控释和释放的稳定性。通过将MSCs接种于复合型微球上,RT-qPCR结果显示成骨基因Runx2,ALP,Col-1和OCN mRNA表达水平上,茜素红染色可见大量的矿化钙结节,表明该复合型微球能促成骨分化和细胞外基质钙化。进一步将RAW264.7接种于微球上,并采用RT-qPCR和免疫荧光染色检测微球的抗炎能力,结果表明该载Res的复合型微球具有抗炎能力,并能降低RAW264.7细胞中促炎细胞因子 TNF-α,IL-1 β和 iNOS 的 mRNA 表达。[结 论]我们成功制备了不同Res含量的n-HA/Res/CS复合微球,优化的CM-30呈现出较佳的药物缓控释曲线,显著提高了微球的抗炎以及促成骨作用,可为未来骨组织工程运用微球载药方式治疗骨相关疾病提供一定的理论基础。