油菜种子发育与油脂的合成代谢是一个复杂的网络调控系统。本研究以实验室早期获得的一个在油菜种子发育后期表达的功能未知基因——BnaLCR78为研究对象,利用生物信息学方法、分子生物学、分子遗传学等技术手段,对该基因结构与功能进行了初步研究,获得了如下研究结果:1.通过生物信息学分析发现BnaLCR78在甘蓝型油菜A组和C组中分别存在1个拷贝,BnaLCR78.A基因全长531 bp,BnaLCR78.C基因全长538 bp,两个基因具有相同的CDS序列,共237 bp,编码78个氨基酸,其蛋白质含有一个信号肽,推测为分泌蛋白,且含有一个跨膜结构域,与拟南芥LCR家族同源。2.通过RT-PCR分析BnaLCR78在甘蓝型油菜中的表达模式,结果显示BnaLCR78基因在根、茎、叶、花中均不表达,在果荚中痕量表达,在种子中稳定表达。通过进一步的组织化学染色分析,发现BnaLCR78基因在种子的子叶中特异性表达。3.成功构建了一系列载体:组成型启动子35S和种子特异型启动子napin启动的过表达载体35S::BnaLCR78、Pnapin::BnaLCR78;干扰载体35S::BnaLCR78RNAi、Pnapin::BnaLCR78RNAi;敲除载体sgRNA-Cas9-78和pYLCRISPR/Cas9-BnaLCR78。4.将上述载体通过农杆菌介导法对甘蓝型油菜“XY15”下胚轴进行遗传转化,通过对抗性苗进行分子检测,成功获得8株35S过表达转基因苗,转化率为2%;19株napin过表达转基因苗,转化率为2.38%;12株35SRNA干扰转基因苗,转化率为3%;21株napin干扰转基因苗,转化率为4.67%;26株pYLCRISPR/Cas9-BnaLCR78转基因油菜,转化率为2.17%;26株sgRNA-Cas9-78转基因苗,转化率为7.9%。5.在T₀代成功获得了纯合突变的敲除材料,并进一步对被编辑的敲除油菜编辑位点和编辑效率进行分析,其中转sgRNA-Cas9-78载体的编辑效率为70%,主要编辑形式主要为单碱基插入。