海蜇活性肽的制备及降血压效果的研究

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本文对新鲜海蜇的头部和腕部进行了一般成分和氨基酸成分的分析,海蜇的蛋白占其干重的50%,其氨基酸成分种类齐全,必须氨基酸含量丰富。分别用酸性蛋白酶、中型蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶胰、蛋白酶以及复合酶对海蜇的蛋白部分进行了酶解,并根据酶解后对ACE抑制活性的强弱,选择出碱性蛋白酶为制备ACE抑制肽的最佳水解酶。通过正交试验,确定出碱性蛋白酶酶解的最适反应条件为酶用量为2%,反应温度为50℃,pH值为9,底物浓度为4%,反应后的水解度为41.8%,酸溶性肽为31.3mg/ml。并对测定海蜇水解液脱苦、调味、杀菌后ACE的抑制活性没有改变。 对海蛰水解液进行超滤膜分离,选用截流分子量为2500和250的膜进行分离出三个部分,结果表明,分子量在250—2500之间的组分对ACE的抑制活性最强并动物试验中效果明显,再用SephedexG—15凝胶过滤对其进一步分离,分离出对ACE抑制活性较强的组分Ⅲ、组分Ⅳ,进行抗消化实验和氨基酸组成分析,组分Ⅲ、组分Ⅳ被消化酶处理后,活性下降不大,保持较高的ACE抑制活性。组分Ⅲ主要包括Pro、Tyr、Leu、Gly、Lys、Glu6种氨基酸;组分Ⅳ主要包括Tyr、Val、Met、Glu、Gly5种氨基酸。 动物实验主要研究了海蜇中降压肽对肾动脉狭窄和L—NNA药物两种高血压模型的血压和心率的影响。肾动脉狭窄型组灌胃和L-NNA药物组的最小有效分别为0.6g/Kg和0.8g/Kg。肾动脉狭窄型动物灌胃最小有效剂量的海蜇降压肽其血压下降为22/16mmHg(收缩压/舒张压),持续时间为4小时,同样条件,L—NNA药物组血压下降15/8mmHg(收缩压/舒张压),持续时间为6小时。并且在海蜇降压肽降压过程中,对心率也有一定的平稳作用。由LD50毒理试验,海蜇降压肽LD50均大于10g/kg.bw。根据急性毒性分级,海蛰降压肽属于实际无毒物质。
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