楸灵素的稳定性及冻融浓缩分离的研究

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本文以楸树内生真菌FSN002发酵液为原料,研究了热、光等因素对其活性次生代谢产物楸灵素稳定性的影响;利用冻融浓缩分离法对发酵液中的楸灵素进行浓缩分离。1.研究了温度对楸灵素稳定性的影响。实验发现楸灵素对热不稳定,热降解反应活化能只有62.8k J/mol,高温条件容易引起楸灵素的降解。热降解速率常数随温度提高而快速上升,降解过程中楸灵素浓度和时间呈现明显的指数相关,热降解符合一级反应动力学。降解速率常数与温度之间的关系符合阿伦尼乌斯方程。4℃条件下楸灵素在发酵液中的半衰期长达25天,25℃条件下则缩短为6天,而55℃条件则进一步下降到14小时。模型预测楸灵素在70℃半衰期只有3.7小时,楸灵素发酵液旋转蒸发会造成大量降解,收率低下,和验证实验结果完全吻合。2.研究了光照对楸灵素稳定性的影响。通过高效液相色谱,检测出不同光照条件下楸灵素降解的动态变化。并建立其光降解动力学模型,定量分析光照对楸灵素稳定性的影响。实验结果表明光照对楸灵素稳定性影响较大,随着光照时间的延长,楸灵素含量呈指数减少的趋势,楸灵素在发酵液中的光降解亦符合一级反应动力学,光降解速率常数随光照强度的增加而增大。在日光灯直射或者窗台自然光散射条件下,光降解在整个降解中所占比重约为85%,是该环境下楸灵素降解的主要因素。随着光照强度增加,降解以光降解为主,热降解在总降解过程中所占比例较小。在后续楸灵素保存中药严格注意避光。3.通过渐进冷冻浓缩法以及结冰融化浓缩法分别对楸树内生真菌FSN002发酵液进行冷冻浓缩。侧重研究了渐进冷冻浓缩法的层状结晶,对层状结晶得到的浓缩液和冰晶从感官上做了定性分析并给出两者对比图片;详细地研究了浓缩比与溶液中楸灵素含量的关系、浓缩比与楸灵素收率的关系。还尝试采用冷冻浓缩法的逆过程——结冰融化浓缩法对楸灵素发酵液进行了浓缩提取,初探其对楸树内生真菌FSN002发酵液产生的分离效果。
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