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为研究三丁酸甘油酯(TB)是否有缓解高棉菜粕饲料给草鱼幼鱼带来的生长、免疫及肠道健康的负面影响,本研究开展两个实验。实验一:设置基础日粮组(S1)、高棉菜粕日粮组(S2)以及在高棉菜粕日粮组中添加500(S3)、1000(S4)、1500 mg/kg TB(S5)共5个处理组,每个组设置3个重复,每个重复50尾草鱼(9.59±0.01)g,养殖实验于水库网箱(2×2×2m)中进行,持续10周,研究高棉菜粕饲料中添加TB对草鱼生长性能、免疫、菌群和肠道屏障的影响。实验二:在实验一基础上,设置高棉菜粕日粮组(T0)以及在高棉菜粕日粮组基础上添加300(T300)、600(T600)、1000mg/kg TB(T1000)共4个处理组,每个组设置3个重复,每个重复40尾草鱼(20.04±0.19)g,养殖实验进行8周后,研究TB是否能缓解LPS刺激后引发草鱼幼鱼产生的免疫应激反应。结果表明:1、高棉菜粕饲料中添加TB对草鱼幼鱼生长和血清生化指标的影响与基础日粮组相比,高棉菜粕组草鱼的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)显著降低、肠道淀粉酶活力显著降低、脂肪酶和胰蛋白酶有降低的趋势,血清甘油三酯(TG)含量显著升高。与高棉菜粕组相比,添加TB后草鱼的WGR及SGR有一定程度的提高,其中1000 mg/kg TB组的WGR和SGR与基础日粮组差异不显著;肠道消化酶活力呈升高的趋势;血清总胆固醇含量显著降低,TG含量呈下降的变化趋势。各处理组间草鱼鱼体成分、血清葡萄糖、总蛋白、白蛋白和尿素氮含量无显著差异。2、高棉菜粕饲料中添加TB对草鱼幼鱼肠道屏障功能的影响与基础日粮组相比,高棉菜粕组草鱼的血清超氧化物歧化酶(SOD)、补体3(C3)、碱性磷酸酶(AKP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、肠道的AKP、钠钾ATP酶(Na+-K+-ATP)、一氧化氮(NO)活力、中肠的绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度值(V/C)、后肠的肌层厚度和肠道IL-10、TGF-β、IκBα、ZO-2和Claudin-b的m RNA水平均显著降低,血清过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)、肠道ZO-1,Claudin-c和Occludin的m RNA水平均有降低的趋势;血清谷丙转氨酶(GPT)活性、中肠隐窝深度、后肠V/C值和隐窝深度、肠道IL-1β、IL-6、IL-8、TLR-4、Claudin-12和MLCK的m RNA水平均显著升高。与高棉菜粕组相比,添加TB后草鱼血清中SOD、T-AOC、C3、C4、免疫球蛋白M(IgM)、AKP和GPx及肠道的Na+-K+-ATP酶和肌酸激酶(CK)活性均呈升高趋势,其中AKP和NO活力显著升高;血清谷草转氨酶(GOT)和GPT含量有降低的趋势;中肠和后肠的隐窝深度显著降低,中肠V/C值和后肠肌层厚度显著升高;1000 mg/kg TB组IL-6、IL-8、NF-κB、Claudin-12和MLCK显著下调,IL-10、IκBα、Claudin-c、Occludin、Claudin-b显著上调。3、高棉菜粕饲料中添加TB对草鱼幼鱼肠道菌群的影响高棉菜粕饲料增加了草鱼肠道微生物的物种数量和丰富度,1000 mg/kg TB的添加降低了物种数量和丰富度,趋近于正常鱼粉组。在门水平上,高棉菜粕饲料组的厚壁菌门和拟杆菌门数量显著增加,变形菌门和蓝藻门数量显著减少。添加1000 mg/kg TB后草鱼的厚壁菌门显著减少,变形菌门和梭杆菌门显著增加,且厚壁菌门、变形菌门的丰富度与正常鱼粉组差异不显著。在属水平上,高棉菜粕饲料组的拟杆菌属、Erysipelatoclostridium属和真杆菌属丰富度显著升高,布劳特氏菌属、埃希氏菌-志贺氏菌属和栖水菌属显著降低。添加1000 mg/kg TB后草鱼的不动杆菌属、Erysipelatoclostridium属、真杆菌属丰富度显著降低,Alkalibacterium属显著升高。4、TB对LPS刺激后草鱼幼鱼免疫应激过程的调节作用高棉菜粕日粮中添加600和1000 mg/kg TB后,草鱼的增重率和特定生长率显著高于高棉菜粕组。经LPS攻毒后,高棉菜粕组和1000 mg/kg TB组草鱼血清C3、C4、IgM、AKP、GLU、SOD及肝脏GOT和GPT均呈先升高后下降的变化趋势,但在一定时间段1000 mg/kg TB组C3、C4、IgM、GLU、SOD、GOT和GPT活性显著高于高棉菜粕组,MDA含量变化上升幅度较为缓和,且低于高棉菜粕组。综上,高棉菜粕饲料会使草鱼幼鱼生长性能下降,对机体免疫及肠道健康产生负面影响。在高棉菜粕饲料中添加三丁酸甘油酯对草鱼生长有促进作用,能提高草鱼的免疫功能及优化肠道组织结构和菌群结构,对草鱼免疫应激反应有一定的调节作用。在本实验条件下,三丁酸甘油酯的最适添加量为600-1000 mg/kg。