DADS下调MRP逆转肝癌细胞耐药性的研究

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目的研究DADS下调MRP与肝癌耐药耐药性的关系。方法选取经病理证实的36例肝癌耐药病人和24例非耐药病人标本,通过免疫组化检测MRP蛋白的表达,分析MRP表达与肝癌耐药之间的关系;建立HepG2肝癌细胞阿霉素耐药细胞系(HepG2-ADM),western blot检测MRP在HepG2-ADM和HepG2中的表达,MTT检测细胞增殖,细胞生长倍增时间,耐药敏感性变化,流式细胞技术检测细胞周期;DADS处理不同的肝癌细胞系后,western blot检测HepG2-ADM+DADS、HepG2+DADS中MRP的表达,MTT检测细胞增殖,细胞生长倍增时间,耐药敏感性变化,流式细胞技术检测细胞周期。结果(1)肝癌耐药患者中,MRP的表达阳性率为80.6%(29/36),明显高于肝癌非耐药患者的20.8%(5/24),两者之间的MRP的表达阳性率有显著性差异(P<0.05)。(2) DADS处理前:耐药细胞株的生长速度较亲本非耐药细胞株明显变慢;DADS处理后:HepG2+DADS、HepG2-ADM+DADS生长速度分别较HepG2、HepG2-ADM的生长速度变慢(P<0.05)。(3) DADS处理前:HepG2-ADM耐药细胞株的细胞生长倍增时间为23.3小时,亲本非耐药HepG2细胞株为13.8小时;DADS处理后: HepG2+DADS、HepG2-ADM+DADS的细胞生长倍增时间分别为23.8小时、35.7小时。(4) DADS处理前:HepG2-ADM耐药细胞株的G2/M期细胞百分比显著高于亲本非耐药HepG2细胞株的比例,两者的G2/M期细胞百分比有显著性差异(P<0.05);DADS处理后:HepG2+DADS、HepG2-ADM+DADS的G2/M期细胞百分比均分别显著高于处理前的HepG2、HepG2-ADM细胞株的比例(P<0.05)。(5) DADS处理前:MRP在HepG2-ADM中高于HepG2;DADS处理后,HepG2+DADS、HepG2-ADM+DADS组的MRP表达较对照组均下调(P<0.05)。(6) DADS处理前:HepG2-ADM耐药细胞株中,阿霉素、紫杉醇、顺铂、5-FU的IC50值均明显高于亲本HepG2组; DADS处理后,HepG2+DADS、HepG2-ADM+DADS的阿霉素、紫杉醇、顺铂、5-FU的IC50值均分别较未处理组HepG2、HepG2-ADM要低,肿瘤细胞对药物的敏感性增加。结论(1) MRP表达增高与肝癌耐药有关;(2) DADS能引起肝癌细胞生长缓慢、细胞周期阻滞、逆转化疗药物的耐药性;(3) DADS通过下调MRP表达逆转肝癌细胞的耐药性。
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