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光敏色素(Phytochrome,PHY)是植物感受外界环境变化的重要光受体,它在植物的生长发育具有重要的调控作用。光敏色素A(PHYA)是高等植物中第一个被发现的光敏色素,调节连续远红光的高辐照度反应(High irradianceresponse,HIR)和单脉冲的极低辐照度反应(Very low fluence response,VLFR)。本研究从水稻中克隆了光敏色素A基因(OsPHYA),对该基因的生理功能和入核模式展开了初步的研究,主要取得了以下结果:
1、克隆了OsPHYA基因,利用半定量RT-PCR法检测OsPHYA基因在水稻植株中光暗条件下的表达水平,结果表明,在光照和黑暗条件下,OsPHYA在根、茎和叶中都有表达.而黑暗条件下OsphyA的表达量高于光照条件下的表达量.
2、测定了VLFR条件下水稻phyA突变体和野生型的萌发率,结果表明水稻phyA在FR介导的极低辐照度反应中起作用,能诱导水稻种子萌发。突变体植株中由于缺少水稻phyA,萌发率普遍降低。
3、研究了水稻phyA对水稻白化苗转绿的影响。结果显示水稻phyA突变体中叶绿素的合成明显受到了影响,表明OsPHYA可能参与到白化苗转绿过程中的叶绿素的合成途径。
4、我们还测定了水稻光敏色素A在各种光质条件下对水稻胚芽鞘伸长的影响。结果显示,水稻phyA能感受远红光信号,抑制水稻胚芽鞘的伸长。同时水稻phyA不调节红光反应。
5、在研究水稻phyA的入核模式过程中,我们推测OsphyA可能具有两种入核方式。一是与拟南芥phyA一样的依赖于光和OsFHL的入核方式;二是依赖于光的单独入核方式。首先我们对OsPHYA和OSFHL基因进行了生物信息学分析,在此基础上,采用酵母双杂交、分子荧光互补技术(BiFc,bimolecular fluorescencecomplementation)等方法验证OsphyA与OsFHL是否相互作用。结果证明,OsphyA与OsFHL在体外可以相互作用,初步推测水稻phyA的入核模式与拟南芥phyA的一样。