论文部分内容阅读
鸡毒支原体病是近年来危害养鸡产业的重要传染病之一，该病病程长，复发率高。目前，国内外对该病主要采用抗生素治疗，但抗生素的大量使用，易导致病原的耐药性逐渐增加。同时，国际残留限量的要求使抗生素的应用受到了相应的限制。中草药因其独特的优势，越来越受到广大学者的青睐。慢呼抗口服液是用于治疗鸡毒支原体病的纯中兽药制剂，方剂配伍、工艺优选、体外治疗及药物化学基础等研究表明，该药具有很好的抗鸡毒支原体病的疗效。因此，本试验将开展慢呼抗口服液在鸡体内血浆药物代谢动力学特性的研究以进一步完善该药物的体内试验，为临床应用奠定基础。首先建立鸡血浆中复方慢呼抗口服液主要成分黄芩苷和绿原酸含量测定的高效液相色谱法（HPLC法）。选择流动相为乙腈-1%冰醋酸，梯度洗脱30min，黄芩苷和绿原酸的检测波长分别为280nm、327nm，流速1mL/min。黄芩苷及绿原酸相应回归方程分别为Y1=0.6724x+0.1793，R=0.999；Y2=0.1725x+0.0551，R=0.9997。黄芩苷及绿原酸最低检测限分别为0.1μg/mL，0.2μg/mL。结果选用甲醇乙腈混合溶剂蛋白沉淀法处理血浆，黄芩苷及绿原酸血浆样品提取回收率分别为84.8%和85.9%。方法专属性好，灵敏度高，准确可靠，已成功应用于海兰鸡口服及静注慢呼抗口服液后血浆中黄芩苷和绿原酸的药代动力学研究。将30只海兰鸡随机分成5组，分别为0.5、1、2g/kg三个剂量灌胃组，1g/kg注射组及对照组。分别于给药前0h和给药后0.17、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、6、8、12、24h采集并分离得到血浆样品，根据所建立的HPLC方法测定黄芩苷和绿原酸的血药浓度，通过DAS药动学软件计算相应的药动学参数，通过比较口服液不同浓度的黄芩苷与绿原酸药动学参数及相对生物利用度，探讨其在鸡体内的药动学特征，为指导临合理用药，减少药物不良反应，确保药物安全以及为慢呼抗口服液提供可靠的理论依据及临床数据。本实验将海兰鸡口服不同剂量的慢呼抗口服液后体内的黄芩苷及绿原酸的主要药动学参数如达峰浓度、达峰时间、药-时曲线下面积和消除半衰期等药代动力学数据进行比较分析。结果表明，0.5、1、2g/kg三个剂量给药后黄芩苷主要药动学参数分别为：AUC（0-∞）为15.92±8.070、29.49±7.046、58.36±6.485mg/L·h；Cmax分别为1.855±0.895、3.464±0.142、7.34±0.4930mg/L；t1/2z分别为11.11±3.201、8.838±2.139、8.112±3.064h；0.5、1、2g/kg三个剂量给药后绿原酸主要药动学参数分别为：AUC（0-∞）为5.760±2.937、12.56±2.082、29.35±2.683mg/L·h；Cmax分别为0.560±0.051、0.970±0.063、2.100±0.024mg/L；t1/2z分别为8.727±6.145、9.718±475、9.669±4.584h；1g/kg静脉注射给药组黄芩苷和绿原酸主要药动学参数分别为：AUC（0-∞）为：65.55±9.936、42.83±7.862mg/L·h；t1/2z分别为7.223±1.746、10.89±1.403h。慢呼抗口服液中黄芩苷和绿原酸在鸡体内的绝对生物利用度分别为42.9%±3.508%和37.6%±2.764%。慢呼抗口服液中黄芩苷在鸡体内分布较广，消除较慢，有效的血药浓度维持时间较长。慢呼抗口服液中绿原酸在鸡体内具有吸收较好、血药浓度较高、消除较慢的动力学特征。