背景:汉滩病毒（Hantaan virus,HTNV）是肾综合征出血热的病原体。目前肾综合征出血热的治疗以对症治疗为主,尚缺乏有效抑制HTNV复制且毒副作用小的药物。研究发现黑种草籽及其有效化学成分百里醌（Thymoquinone,TQ）能有效抑制多种微生物感染。本文拟从体内、外两个层面,研究TQ对HTNV感染的抑制作用,并深入探讨TQ对HTNV感染激活的TLR4/NF-k B信号通路及其炎症因子表达的影响,揭示TQ抑制汉滩病毒感染的靶点,为探索TQ的新的生物学活性以及TQ作为抗HTNV的药物提供实验依据。方法:（1）TQ抑制HTNV在宿主细胞内的复制及其机制。1.通过MTT（四唑盐）比色法检测药物作用后的细胞存活率,确定TQ对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的细胞毒性。2.从抗生物合成、直接杀伤、抗吸附作用、预防作用等四种作用方式确认TQ的抑制病毒复制的效应。3.采用实施定量PCR（RT-q PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）、酶联免疫吸附实验（ELISA）等方法检测各组细胞中TLR4、NF-k B的表达或激活并检测IL-6、IP-10下游炎症因子在细胞内外的表达。（2）TQ对HTNV感染动物的保护作用。1.建立HTNV感染动物模型。将2日龄Ba Lb/C乳鼠颅内接种不同滴度的HTNV,通过观察乳鼠生存率、平均生存天数,明确HTNV感染乳鼠LD50。2.用低（5mg/kg/d）、中（10mg/kg/d）、高（20mg/kg/d）不同浓度TQ和利巴韦林（10mg/kg/d）分别腹腔注射感染HTNV乳鼠,通过观察病毒感染乳鼠生存率、体重变化、组织中病毒核酸、病毒蛋白改变等,综合评价TQ抗病毒效果以及对病毒感染乳鼠的保护作用。3.分别于感染后3d、5d、7d、9d、12d收集乳鼠组织（脑、肺、肾）,通过组织切片HE染色,观察乳鼠组织病理改变,初步探索TQ对HTNV感染动物炎症因子表达的影响。结果:1.TQ在25μM浓度范围内,HUVECs存活率大于80%,且TC50为118.7μM。2.TQ通过抗生物合成作用抑制HTNV在HUVECs中的复制,而不是通过直接杀伤、抗吸附、预防三种方式抑制HTNV感染。此外TQ抑制HTNV感染呈剂量依赖效应与时间依赖效应。IC50为8.96μM,TI值为13.26。3.TQ能抑制HTNV感染引起的TLR4/NF-k B通路激活并且降低其下游炎症因子IL-6和IP-10表达。4.50LD50 HTNV感染乳鼠经TQ处理后体重下降、精神萎靡、被毛粗乱、反应性增高、弓背、尾鞭样改变、后腿麻痹瘫痪和震颤痉挛等症状出现均延迟,平均生存天数亦延长,其中中浓度（10mg/kg/d）TQ延长平均生存天数时间最长（1.6 d）,但其效果不及阳性对照药物利巴韦林（延长了2.6 d）。5.感染HTNV乳鼠脑、肺组织中病毒载量随感染天数而不断增加;与病毒感染组相比,低、中、高浓度TQ处理组HTNV感染乳鼠体内脑和肺组织病毒载量明显降低;HTNV感染第12d乳鼠脑、肺组织中,中浓度TQ组病毒抑制效率分别为23.18%±6.36%和35.72%±1.04%,而利巴韦林组病毒抑制效率则分别为50.49%±2.73%和59.76%±3.51%。6.HE染色切片显示TQ减轻了乳鼠中由于病毒感染诱导造成的脑、肺、肾组织中炎症损伤。结论:TQ可抑制HTNV在HUVECs中复制,并且TQ通过抑制TLR4/NF-k B通路发挥抗炎作用。进而动物实验验证TQ能延长乳鼠生存时间且降低HTNV感染乳鼠炎症反应。