论文部分内容阅读
目的:检测冠心病（coronary heart disease,CHD）患者和健康对照组的血清同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）、尿酸（uric acid,UA）以及肠道菌群（gut microbiota,GM）。分析CHD患者和健康对照组血清Hcy、UA水平差异;分析两组GM改变情况,筛查两组菌群差异及两组优势菌群;分析肠道菌群与Hcy、UA相关性,筛查与Hcy、UA水平密切相关的菌群。方法:选取2021年3月至2021年12月在山西医科大学第二医院心内科住院并且经冠状动脉造影检查首次诊断为CHD的42例CHD患者进行研究;健康对照组（34例）来源于同期在山西医科大学第二医院体检中心体检的健康人群。所有入选对象均签署知情同意书。收集两组研究对象的临床资料及相关化验、检查。收集CHD组入院后首次空腹状态下的血液样本和首次粪便标本,收集对照组体检当天的血液样本和粪便样本。采用尿酸酶-过氧化物酶法测定血清UA水平,采用酶循环法测定血清Hcy水平。采用16Sr RNA测序技术检测两组肠道菌群,两组菌群采用Alpha多样性（Chao1、shannon、simpson指数）、Beta多样性及LEf Se分析进行比较（LDA绝对值＞4表示差异有统计学意义）。比较两组血清Hcy、UA水平（P＜0.05表示差异有统计学意义）。采用ROC曲线分析血清Hcy、UA对冠心病发生的预测价值。采用Spearman相关性分析血清Hcy、UA水平与不同菌种的相关性。结果:1.两组一般资料比较两组研究对象在性别、年龄、BMI、职业、吸烟史、饮酒史等一般资料无统计学差异（P＞0.05）。2.两组血清Hcy、UA水平比较与对照组相比,CHD组血Hcy、UA水平升高,两组差异具有统计学意义（P＜0.05）。3.血Hcy、UA水平对CHD发生的预测价值ROC曲线结果显示,血清Hcy的AUC为0.949,最佳截断值为14.3μmol/L,敏感度为88.10%,特异度为94.10%;血清UA的AUC为0.872,最佳截断值为383.0μmol/L,敏感度为78.60%,特异度为79.40%。Hcy的AUC值大于UA。4.两组肠道菌群的比较Alpha多样性和Beta多样性分析显示,无论是在门水平还是属水平上,两组肠道菌群的物种丰度和物种多样性均存在显著差异。在门水平上,两组检测出的菌群有拟杆菌门（Bacteriodetes）、厚壁菌门（Firmicutes）、放线菌门（Actinobacteria）、变形菌门（Proteobacteria）、疣微菌门（verrucomicrobia）、衣原体（chlamydiae）等,其中主要优势菌群为拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门及变形菌门。与健康对照组相比,CHD组中Firmicutes丰度较高,而Bacteriodetes和Proteobacteria丰度较低（P＜0.05）,两组Actinobacteria丰度无明显差异（P＞0.05）。在属水平上,两组检测出的细菌有:拟杆菌属（Bacteroides）、真细菌属（Eubacterium）、粪杆菌属（Faecalibacterium）、埃希氏菌属（Escherichia）、梭菌属（Clostridium）、另枝菌属（Alistipes）等。与健康对照组相比,CHD组拟杆菌属丰度较低,真细菌属、粪杆菌属、梭菌属、另枝菌属丰度较高（LDA值＞4）。在种水平上,与健康对照组相比,CHD组E.faecalis含量较高,而Lac、Eco、Bif含量较低。基于对基因集的KEGG注释结果,计算出每个样本KO和map的丰度（KO代表具有类似功能的所有蛋白集合;map是检测蛋白所富集的信号通路）。两组间KO和map的Beta多样性分析和LEf Se分析显示,两组代谢存在显著差别。5.血清Hcy、UA与肠道菌群的相关性Spearman相关分析结果显示,Hcy与Lac（r=-0.359,P=0.001）、Eco（r=-0.415,P=0.000）、Bif（r=-0.364,P=0.001）呈负相关,与E.faecalis（r=0.371,P=0.001）呈正相关;UA与Lac（r=-0.366,P=0.001）、Eco（r=-0.289,P=0.011）、Bif（r=-0.360,P=0.001）呈负相关,与E.faecalis（r=0.286,P=0.012）呈正相关。结论:CHD患者存在肠道菌群失调,肠道菌群可能通过影响Hcy、UA的代谢来参与CHD的发生发展。通过调节肠道菌群失调可能成为预防和治疗CHD的新方法。