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国内外许多研究报道表明,已发现有37种酶能够非专一性地水解壳聚糖,其中包括纤维素酶、木瓜蛋白酶、半纤维素酶、脂肪酶、溶菌酶等。木聚糖酶是半纤维素酶的一种,目前其水解壳聚糖的研究报道较少。本论文的研究,对于进一步阐明木聚糖酶水解壳聚糖的作用机理具有重要的学术意义,同时对于酶法生产低分子量壳聚糖具有重要的应用价值。本文首先对木聚糖酶及其他四种酶水解壳聚糖的活性进行了比较,结果表明:木聚糖酶对壳聚糖的水解活性最高。该酶水解壳聚糖的最佳条件是:pH4.75、温度60℃、加酶量15%。在底物的浓度不超过20g/L时,木聚糖酶对壳聚糖的水解过程是符合Michaelis-Menten方程的,其中,Vmax=15.3μmol/min·L,Km=3.5g/L。这也说明,在底物浓度足够低的情况下,木聚糖酶对壳聚糖的水解过程是单底物酶促反应,每个酶分子只有一个结合位点,反应中只形成一种络合物。在了解酶解动力学的基础上,使用Sepharose CL-6B凝胶色谱法测定了水解产物的分子量分布,并将其他几种酶水解壳聚糖的产物分子量分布与它进行了比较,结果表明:经过木聚糖酶水解6h后的壳聚糖的分子量集中在8.6kDa左右;而加入灭活木聚糖酶水解6h后的壳聚糖分子量集中在18.4kDa;,黑曲霉来源的纤维素酶液水解0.5h后的壳聚糖分子量为11.9kDa;青霉来源的纤维素酶粉水解0.5h后的壳聚糖分子量为13.3kDa;黑曲霉来源的纤维素酶粉水解0.5h后的壳聚糖分子量为12.6kDa。最后,对商业来源的木聚糖酶液进行了分离纯化。纯化过程中酶活损失较小,木聚糖酶活损失为5200U,壳聚糖酶活损失为3000U。并使用SDS-PAGE和HPLC对酶的组分进行了分析。从结果来看,木聚糖酶中主要由以下几种分子量的组分组成:55kDa,34kDa。具体是哪一种组分对壳聚糖的水解有效果,目前还不清楚,还需要作进一步的研究和探讨。